目的 研究过氧化氢(H2O2)引起的氧化应激损伤对小鼠肾小管上皮细胞(TCMK-1)Klotho蛋白表达的影响及可能的作用机制.方法 体外培养TCMK-1细胞,以不同浓度的H2O2刺激细胞,采用流式细胞术检测活性氧族(ROS)生成;CCK-8检测细胞生存率;流式细胞术和Hoechst 33258染色检测细胞凋亡;Western印迹法检测Klotho蛋白、细胞凋亡相关蛋白和抗氧化酶的表达.结果 与正常对照组比较,H2O2刺激后TCMK-1细胞内ROS水平升高(均P＜ 0.05),抗氧化酶锰超氧化物歧化酶(manganese superoxide dismutase,SOD2)和过氧化氢酶(catalase,CAT)表达水平降低(均P＜0.05);Klotho蛋白的表达水平降低(均P＜0.05);TCMK-1细胞生存率显著降低(均P＜0.05),且呈剂量依赖(0.3～0.9 mmol/L H2O2);TCMK-1凋亡细胞比例呈剂量依赖性增加(均P＜ 0.05);Bax/Bcl-2表达比升高,JNK、p38蛋白磷酸化水平均升高(均P＜ 0.05).结论 H2O2刺激TCMK-1细胞诱导氧化应激损伤,抑制Klotho蛋白的表达,而Klotho表达下降伴随着细胞凋亡的增加和p38、JNK通路的活化.
作者：沈玥；严玉澄；路丽明；钱盈盈；关雪晶；倪兆慧；钱家麒
来源：中华肾脏病杂志 2015 年 31卷 8期
