目的 探讨乌索酸是否通过改善高糖状态下的足细胞自噬抑制,发挥其肾脏保护作用.方法 体外高糖培养小鼠条件永恒足细胞株,加入PI3K抑制剂LY294002及乌索酸进行干预.RT-qPCR法检测细胞内微小RNA-21 (miR-21)和磷酸酶基因(PTEN)的mRNA表达.Western印迹法检测磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路相关蛋白,自噬相关蛋白及足细胞标志蛋白的表达变化.采用荧光显微镜观察足细胞标志蛋白、内源性微管相关蛋白LC3的表达变化.透射电镜下观察足细胞内自噬体的形成.结果 与对照组相比,高糖组足细胞自噬相关蛋白LC3Ⅱ、Beclinl的表达降低,泛素结合蛋白p62(p62/SQSTM1)表达增高;足细胞标志蛋白synaptopodin、podocin及nephrin表达降低;同时伴miR-21表达上调,PTEN的mRNA和蛋白表达均下调,p85-P13K、磷酸化(p)-Akt、p-mTOR表达增加(均P＜0.01).加入LY294002及乌索酸干预后,p85-P13K、磷酸化(p)-Akt、p-mTOR表达减少;足细胞自噬相关蛋白LC3II、Beclinl的表达增加,p62/SQSTM1表达降低;足细胞标志蛋白synaptopodin、podocin及nephrin表达降低(均P＜0.01),但LY294002对足细胞内miR-21和PTEN的表达无影响.乌索酸可抑制细胞内miR-21的过表达,上调PTEN表达(均P＜ 0.05).结论 高糖可抑制

作者：徐莉；范秋灵；汪旭；李琳；卢新星；岳媛；曹旭；刘佳；赵雪

来源：中华肾脏病杂志 2015 年 31卷 11期