目的 探讨高糖是否通过改变肾小球系膜细胞中miRNA-21的表达,调控PTEN和PI3K/Akt/mTOR信号通路,进而调节自噬和糖尿病肾脏损伤,及抑制miRNA-21的作用对该过程的影响.方法 大鼠肾小球系膜细胞(HBZY-1)应用脂质体2000转染试剂分别转染miRNA-21抑制物和阴性对照,转染稳定后分别在正常糖及高糖条件下培养48 h,分为正常糖组(5.5 mmol/L葡萄糖)、正常糖阴性对照组(转染阴性对照+5.5 mmol/L葡萄糖)、正常糖miRNA-21抑制物组(转染miRNA-21抑制物+5.5 mmol/L葡萄糖)、高糖组(25.0 mmol/L葡萄糖)、高糖阴性对照组(转染阴性对照+25.0 mmol/L葡萄糖)、高糖miRNA-21抑制物组(转染miRNA-21抑制物+25.0 mmol/L葡萄糖).采用MTT法检测细胞的存活及增殖能力;总蛋白/细胞数评估细胞肥大;Western印迹和实时定量PCR检测miRNA-21、PTEN-PI3K/Akt/mTOR信号通路活性、Ⅰ型胶原及自噬标志物(p62和LC3Ⅱ).透射电镜观察自噬体的形成及数量.结果 与正常对照组比较,高糖组系膜细胞明显肥大、增殖,胞内miRNA-21表达上调,PTEN蛋白及mRNA的表达显著下调,p-Akt、p-mTOR、Ⅰ型胶原、p62表达均增加,LC3Ⅱ表达和自噬体数量降低(均P＜ 0.01).与高糖组比较,高糖miRNA-21抑制物组细胞肥大程度和增殖率均降低,p-Akt、p-mTOR、Ⅰ型胶原、p62的表达

作者：卢新星；范秋灵；徐莉；曹旭；苏彦；张东成；王力宁

来源：中华肾脏病杂志 2017 年 33卷 1期