目的 探讨微小RNA-15b(microRNA-15b,miR-15b)对人腹膜间皮细胞向上皮间充质转分化(EMT)的调节作用及可能的分子机制.方法 使用138 mmol/L高糖溶液刺激人腹膜间皮细胞株(HMrSV5) 24 h,观察高糖溶液对HMrSV5细胞miR-15b表达的影响;转染miR-15b模拟物(miR-15b mimic)使HMrSV5中miR-15b过表达或转染miR-15b抑制剂抑制HMrSV5中miR-15b的表达,再给予138 mmol/L高糖溶液刺激24 h,采用实时荧光定量PCR、Western印迹等方法,观察过表达miR-15b或抑制miR-15b表达对高糖诱导的HMrSV5细胞EMT相关蛋白和基因表达的影响.同时,观察调节miR-15b后,Smad7的mRNA和蛋白表达的改变.结果 138 mmol/L高糖溶液可使HMrSV5中miR-15b表达明显升高,转染miR-15b模拟物后可明显降低高糖诱导的上皮标志物E-cadhenn的表达,并增加高糖引起的间充质标志物Vimentin及纤维化标志物Fibronectin mRNA和蛋白的高表达(均P<0.05);而转染miR-15b抑制剂则结果相反.同时,转染miR-15b mimic可明显抑制高糖诱导的Smad7 mRNA及蛋白水平的上调(P<0.05),而转染miR-15b抑制剂可明显增加高糖诱导的Smad7 mRNA及蛋白水平的上调(P<0.05).结论 miR-15b在高糖刺激腹膜间皮细胞HMrSV5转分化过程中上调,其可能通过调节TGF-β/Smad通路影响腹膜间皮细胞-上皮间充
作者:陈嘉仪;胡海棠;潘健怡;张炜;陈进忠;钟少鑫;莫敏;窦献蕊
来源:中华肾脏病杂志 2017 年 33卷 4期