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目的 探讨高尿酸诱导的肾小管上皮细胞-间充质转分化(EMT)的作用及机制.方法 体外培养正常大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E),用不同浓度的尿酸(100、200、400、600、800 μmo]/L UA)刺激48 h诱导其转分化,倒置相差显微镜观察细胞形态的变化,Western印迹法检测各组细胞内E钙黏蛋白(E-cadherin)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Akt和磷酸化(p)-Akt蛋白的表达,荧光显微镜观察细胞E-cadhern及α-SMA分布的改变.选用400μmol/L UA作为观察剂量,用不同浓度PI3K/Akt通路抑制剂LY294002(0、2.5、5、10、15 μmol/L)预处理NRK-52E 1 h后以UA刺激48 h,Western印迹法检测对照组和干预组细胞内p-Akt和Akt蛋白表达的变化.将NRK-52E分为4组:对照组、UA组、LY294002组、UA+LY294002组,Western印迹法检测各组细胞内E-cadherin和α-SMA蛋白的表达,免疫荧光观察细胞E-cadherin、α-SMA、p-Akt分布的改变.结果 正常NRK-52E细胞表达E-cadherin,而α-SMA蛋白表达较少;400、600、800 μmol/L UA组细胞α-SMA蛋白表达增加(均P<0.05),E-cadherin蛋白表达减少(均P< 0.05),p-Akt蛋白表达增多(均P<0.05),Akt蛋白表达没有明显变化(均P> 0.05).细胞形态由典型的上皮细胞向肌成纤维细胞转变,表明UA诱导肾小管上皮细胞EMT模型成功,同时激活

作者:熊晓燕;白寿军;王亚琨;姬婷婷;杜红秀;李肖瑛;高聪普;刘娟;朱迎春;查芳芳

来源:中华肾脏病杂志 2018 年 34卷 2期

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作者:
熊晓燕;白寿军;王亚琨;姬婷婷;杜红秀;李肖瑛;高聪普;刘娟;朱迎春;查芳芳
来源:
中华肾脏病杂志 2018 年 34卷 2期
标签:
尿酸 肾小管 上皮细胞 上皮细胞-间充质转分化 PI3K/Akt Uric acid Kidney tubules Epithelial cells Epithelial-mesenchymal transition PI3K/Akt
目的 探讨高尿酸诱导的肾小管上皮细胞-间充质转分化(EMT)的作用及机制.方法 体外培养正常大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E),用不同浓度的尿酸(100、200、400、600、800 μmo]/L UA)刺激48 h诱导其转分化,倒置相差显微镜观察细胞形态的变化,Western印迹法检测各组细胞内E钙黏蛋白(E-cadherin)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Akt和磷酸化(p)-Akt蛋白的表达,荧光显微镜观察细胞E-cadhern及α-SMA分布的改变.选用400μmol/L UA作为观察剂量,用不同浓度PI3K/Akt通路抑制剂LY294002(0、2.5、5、10、15 μmol/L)预处理NRK-52E 1 h后以UA刺激48 h,Western印迹法检测对照组和干预组细胞内p-Akt和Akt蛋白表达的变化.将NRK-52E分为4组:对照组、UA组、LY294002组、UA+LY294002组,Western印迹法检测各组细胞内E-cadherin和α-SMA蛋白的表达,免疫荧光观察细胞E-cadherin、α-SMA、p-Akt分布的改变.结果 正常NRK-52E细胞表达E-cadherin,而α-SMA蛋白表达较少;400、600、800 μmol/L UA组细胞α-SMA蛋白表达增加(均P<0.05),E-cadherin蛋白表达减少(均P< 0.05),p-Akt蛋白表达增多(均P<0.05),Akt蛋白表达没有明显变化(均P> 0.05).细胞形态由典型的上皮细胞向肌成纤维细胞转变,表明UA诱导肾小管上皮细胞EMT模型成功,同时激活