目的 观察缺氧对脂肪细胞脂联素mRNA和蛋白表达的影响,探讨肥胖小鼠脂肪组织缺氧导致脂肪组织脂联素表达下降的机制.方法 采用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blotting)检测遗传型肥胖小鼠(ob/ob,12周)和高脂饮食肥胖小鼠(HFD,53周)的附睾旁脂肪中脂联素mRNA和蛋白的表达；用小鼠3T3-L1脂肪细胞系为模型,采用RT-PCR和荧光素酶报告基因方法检测缺氧处理后脂联素和过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)-γ mRNA的表达和稳定性、脂联素启动子的活性；用Western blotting和荧光素酶报告基因检测缺氧对PPAR-γ在核蛋白中集聚以及PPAR-γ转录因子活性的影响.组间数据比较采用t检验.结果 (1)缺氧时两种肥胖小鼠的脂肪组织中脂联素mRNA和蛋白的表达均显著下降(P＜0.01)；3T3-L1脂肪细胞系在缺氧8h和24 h后,脂联素mRNA表达量分别下降至0.65 ±0.05和0.29 ±0.05,较对照组(1.00±0.04)明显降低,差异有统计学意义(t=11.548、24.893,均P＜0.01),但缺氧对脂联素mRNA的稳定性并没有影响；荧光素酶报告基因方法表明,脂联素启动子的活性受到缺氧的抑制.(2)在两种肥胖小鼠的脂肪组织中,PPAR-γ mRNA和蛋白的表达均明显下降(P＜0.01)；小鼠3T3-L1脂肪细胞系在缺氧8h和24 h后,PPAR-γ mRNA的表达量分别
作者：何庆；高占国；李晓通；叶建平
来源：中华糖尿病杂志 2013 年 5卷 8期
