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目的 研究红芪多糖(HPS)对高糖条件下人脐静脉内皮细胞(HUVEC)合成和释放一氧化氮(NO)和内皮素-1(ET-1)的影响及作用机制.方法 从新鲜脐带中分离HUVEC进行鉴定、培养,细胞分为正常对照组、高糖组(30 mmol/L葡萄糖)和HPS干预组.MTI比色法分析HPS对高糖诱导HUVEC增殖率的影响,流式细胞术Annexin-V/PI双染法检测细胞凋亡,硝酸盐还原酶法检测上清液中NO的水平,分光光度法检测细胞内一氧化氮合酶(NOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的浓度,酶联免疫吸附(ELISA)法检测上清液中ET-1的含量,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、ET-1和c-Jun氨基末端激酶1(JNK1) mRNA的表达水平.组间差异显著性检验使用单因素方差分析,组间两两比较使用LSD法.结果 高糖组在6 h[(82.4±3.5)%]、24 h[(68.2±1.4)%]、48 h[(63.0 ±2.9)%]的细胞增殖率显著低于对照组(100%,P<0.05);HPS干预组细胞增殖率随浓度变化呈现先上升后下降的趋势,其中50 mg/L[(85.3±4.6)%]、100 mg/L[(89.6±1.1)%]、200 mg/L[(88.8±3.6)%]HPS干预组较高糖组增加,差异具有统计学意义(均P <0.05);高糖组NO[(24.84±1.34) μmol/L]、NOS[(0.54 ±0.06) U/ml]含量较正常对照组呈现下降的趋势,iNOS[(0.133±0.015)U/ml]

作者:刘静;邓文娟;魏素虹;牛瑞兰;许衍甲;权金星;田利民;周淑红;张琦

来源:中华糖尿病杂志 2013 年 5卷 9期

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刘静;邓文娟;魏素虹;牛瑞兰;许衍甲;权金星;田利民;周淑红;张琦
来源:
中华糖尿病杂志 2013 年 5卷 9期
标签:
红芪多糖 人脐静脉内皮细胞 高糖 一氧化氮 内皮素-1 Radix hedysari polysaccharide Human umbilical vein endothelial cells High glucose Nitric oxide Endothelin-1
目的 研究红芪多糖(HPS)对高糖条件下人脐静脉内皮细胞(HUVEC)合成和释放一氧化氮(NO)和内皮素-1(ET-1)的影响及作用机制.方法 从新鲜脐带中分离HUVEC进行鉴定、培养,细胞分为正常对照组、高糖组(30 mmol/L葡萄糖)和HPS干预组.MTI比色法分析HPS对高糖诱导HUVEC增殖率的影响,流式细胞术Annexin-V/PI双染法检测细胞凋亡,硝酸盐还原酶法检测上清液中NO的水平,分光光度法检测细胞内一氧化氮合酶(NOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的浓度,酶联免疫吸附(ELISA)法检测上清液中ET-1的含量,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、ET-1和c-Jun氨基末端激酶1(JNK1) mRNA的表达水平.组间差异显著性检验使用单因素方差分析,组间两两比较使用LSD法.结果 高糖组在6 h[(82.4±3.5)%]、24 h[(68.2±1.4)%]、48 h[(63.0 ±2.9)%]的细胞增殖率显著低于对照组(100%,P<0.05);HPS干预组细胞增殖率随浓度变化呈现先上升后下降的趋势,其中50 mg/L[(85.3±4.6)%]、100 mg/L[(89.6±1.1)%]、200 mg/L[(88.8±3.6)%]HPS干预组较高糖组增加,差异具有统计学意义(均P <0.05);高糖组NO[(24.84±1.34) μmol/L]、NOS[(0.54 ±0.06) U/ml]含量较正常对照组呈现下降的趋势,iNOS[(0.133±0.015)U/ml]