目的 研究糖基化终末产物(AGEs)对人胰岛微血管内皮细胞(HIMVEC)黏附分子表达和白细胞黏附的影响.方法 HIMVEC细胞在200 mg/L的AGEs刺激后,用细胞基础的酶联免疫吸附法(ELISA)和Western blotting法检测细胞表面黏附分子的表达;并与BCECF标记的白细胞共培养检测与白细胞的黏附能力.采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blotting分别检测HIMVEC细胞上AGEs受体(RAGE)、蛋白激酶Cβ(PKC β)和蛋白激酶A(PKA)的mRNA表达情况.随后给予PKC β抑制剂LY333531或PKA激活剂8-Br-cAMP,观察对HIMVEC黏附分子表达的影响及和白细胞黏附的影响.两组间比较采用t检验进行分析.结果 与对照组相比,AGEs处理后HIMVEC表达P选择素、E选择素和血管细胞黏附分子1(VCAM-1)均上调(分别为1.10 ±0.13比0.64±0.14,0.83 ±0.06比0.47 ±0.05,0.87 ±0.09比0.43±0.07,t =4.93、9.40、7.61,均P<0.05),并且与白细胞的黏附较对照组明显增加(54 ±4比23 ±3,t=12.69,P<0.05).与AGEs组比较,RAGE抗体组P选择素、E选择素和VCAM-1的表达明显降低,组间差异具有统计学意义(t=5.69、6.89、5.43,均P<0.05).RAGE抗体组白细胞黏附明显少于AGEs组(54±4比31 ±4,t=8.22,P<0.05).与对照组相比,AGEs处理HIMVEC 4 h和18h,在mRNA水平和蛋白
作者:刘虹麟;许世清;王在;彭亮;房青;邓婷婷;游嘉;娄晋宁;张文健
来源:中华糖尿病杂志 2014 年 6卷 6期