目的:观察条件永生化的小鼠足细胞在高糖及硫辛酸干预环境下,足细胞凋亡率及内质网应激反应( ERS )标志分子半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶12( Caspase-12)和葡萄糖调节蛋白78(GRP78)的表达量,探究足细胞凋亡的发生与内质网应激反应的关系。方法将分化良好的足细胞随机分为:正常葡萄糖浓度对照组(5.6 mmol/L)、甘露醇高渗对照组(25 mmol/L)、高糖组(25 mmol/L)、高糖+硫辛酸组(25 mmol/L高糖+500μmol/L硫辛酸)。作用48 h后,流式细胞仪测定各组足细胞凋亡率;实时定量聚合酶链反应( RT-PCR)技术检测GRP78及Caspase-12 mRNA的表达水平,Western blotting技术检测GRP78及Caspase-12蛋白质表达水平,各组之间凋亡率及GRP78与Caspase-12的mRNA与蛋白的表达量比较采用LSD-t检验。结果(1)流式细胞仪检测各组足细胞凋亡率发现:正常葡萄糖浓度对照组足细胞凋亡率与高渗对照组足细胞凋亡率相似( P>0.05);高糖组足细胞凋亡率较正常葡萄糖浓度对照组明显升高[(14.0±1.1)%比(3.4±0.6)%,t=9.12,P<0.05];高糖+硫辛酸组足细胞的凋亡率与高糖组相比明显降低[(14.0±1.1)%比(7.8±0.6)%,t=7.73,P<0.05]。(2)高糖组GRP78与Caspase-12 mRNA的表达量与正常葡萄糖浓度对照组
作者:秦洁;马春明;张姬欣;聂琳;张红霞;马禅娟;柳洁
来源:中华糖尿病杂志 2014 年 7期