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目的 探讨不同种类酰胺类局麻药对脂肪起源间充质干细胞成软骨能力影响.方法 分离培养四月龄新西兰大白兔脂肪起源干细胞(ADMSCs)并向软骨方向诱导分化.取贴壁生长的第三代软骨方向分化ADMSCs,分别用磷酸缓冲液(对照组)、1%利多卡因(1%利多卡因实验组)、2%甲哌卡因(2%甲哌卡因实验组)、0.5%布匹卡因(0.5%布匹卡因实验组)和0.5%罗哌卡因(0.5%罗哌卡因实验组)浸泡30 min、60 min.5组在各时间点处理完成后,洗去局麻药,重新加入软骨方向诱导分化培养液,分别于培养第3天和第7天后采用流式细胞术检测细胞凋亡情况,并行番红-固绿染色评估软骨分化形态学变化,筛选出毒性最小的局麻药.将筛选出的毒性最小的一种局麻药稀释至25%,50%,75%,100%的浓度分别与软骨分化方向ADMSCs接触30 min和60 min,然后洗去局麻药重新加入软骨方向诱导分化培养液,在培养第3天和第7天后采用实时荧光定量(qPCR)和Western blot法检测软骨分化相关基因collagen Ⅰ、collagenⅢ、SOX9的表达,明确其对ADMSCs成软骨能力的影响.结果 软骨方向分化的ADMSCs与对应的局麻药物接触后,1%利多卡因实验组、2%甲哌卡因实验组、0.5%布匹卡因实验组和0.5%罗哌卡因实验组软骨方向分化的ADMSCs凋亡率较对照组均显著增加,差异有统计学意义(P

作者:吴涛;宋海新;李扬政;李建华

来源:中华物理医学与康复杂志 2019 年 41卷 4期

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作者:
吴涛;宋海新;李扬政;李建华
来源:
中华物理医学与康复杂志 2019 年 41卷 4期
标签:
干细胞 局麻药 细胞毒性 再生医学 Mesenchymal stem cells Local anesthetics Cytotoxicity Regenerative medicine
目的 探讨不同种类酰胺类局麻药对脂肪起源间充质干细胞成软骨能力影响.方法 分离培养四月龄新西兰大白兔脂肪起源干细胞(ADMSCs)并向软骨方向诱导分化.取贴壁生长的第三代软骨方向分化ADMSCs,分别用磷酸缓冲液(对照组)、1%利多卡因(1%利多卡因实验组)、2%甲哌卡因(2%甲哌卡因实验组)、0.5%布匹卡因(0.5%布匹卡因实验组)和0.5%罗哌卡因(0.5%罗哌卡因实验组)浸泡30 min、60 min.5组在各时间点处理完成后,洗去局麻药,重新加入软骨方向诱导分化培养液,分别于培养第3天和第7天后采用流式细胞术检测细胞凋亡情况,并行番红-固绿染色评估软骨分化形态学变化,筛选出毒性最小的局麻药.将筛选出的毒性最小的一种局麻药稀释至25%,50%,75%,100%的浓度分别与软骨分化方向ADMSCs接触30 min和60 min,然后洗去局麻药重新加入软骨方向诱导分化培养液,在培养第3天和第7天后采用实时荧光定量(qPCR)和Western blot法检测软骨分化相关基因collagen Ⅰ、collagenⅢ、SOX9的表达,明确其对ADMSCs成软骨能力的影响.结果 软骨方向分化的ADMSCs与对应的局麻药物接触后,1%利多卡因实验组、2%甲哌卡因实验组、0.5%布匹卡因实验组和0.5%罗哌卡因实验组软骨方向分化的ADMSCs凋亡率较对照组均显著增加,差异有统计学意义(P