本文首次描述了提取纯化破伤风神经毒素重链N-末端B片段的工作。首先从培养滤液中制备破伤风毒素，通过高压液相层析分离由木瓜蛋白酶裂解毒素产生AB和C片段，AB片段经100mmol/L DTT还原和2mol/L尿素处理后，用离子交换层析Mono Q柱提取分离的A和B片段。柱子用20mmol/L Tris-HC1缓冲液，pH7.6，含2mol/L尿素及1mmol/L DTT平衡和用NaCl线性梯度（0—0.5mol/L）洗脱得到纯化的B片段。在SDSPAGE中纯化的B片段形成单一的蛋白质带，分子量为48000，等电点为7.3和6.7。该片段从AB的收率为50—72
作者：雷殿良；松田守弘
来源： 1991 年 11卷 5期
