抗胃癌鼠单抗3G9 Fab段基因的克隆及其在大肠杆菌的表达-临床诊疗知识库

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作者：

王琰；徐建军；励跃；董志伟；刘华

来源：

1993 年 13卷 5期

标签：

PCR 单克隆抗体免疫球蛋白可变区基因 Fab段表达

本文报道用聚合酶链延伸反应（PCR）从分泌抗胃癌鼠单抗的杂交瘤细胞系3G9中克隆出了重链Fd段和k链的基因。DNA序列测定表明3G9的V H、D、J H分别属于V H7183、DFL16.1和J H3；V k和J k分别属于V k Ⅱ和J k2。将3G9 Fd段和k链cDNA克隆到表达载体pComb3中，在大肠杆菌中获得了表达，用还原和非还原的SDS-PAGE电泳作免疫印迹实验（western blotting），证明了Fab段的表达。并用酶联免疫过滤实验初步证明了大肠杆菌表达的3G9 Fab段具有特异性的抗原结合活性。

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