目的 构建hIFN-α2B-BCG重组体,探讨其对膀胱肿瘤细胞的生物学效应.方法 对重组BCG与常规BCG生长情况和形态学进行比较;生长10代后,ELISA法测定菌体内、外表达hIFN-α-2B量.重组BCG体外作用于膀胱肿瘤细胞EJ、MB49后行电镜和MTT检测细胞抑制率.结果 常规BEG与重组BCG生长差异无统计学意义:1～7 d为近似对数生长期,600 nm处吸光度(A)值从0.1升到1.2左右,然后进人平台期.重组BCG和常规BCG抗酸染色均为阳性,均保持相互连接的特点,但重组BCG稍大,余无明显异常.1 ml重组BCG分泌IFN-α-2B为997.2 pg,菌内含量为99.3 pg.连续传10代的重组BCG分泌量为990.3 pg,与第一代无明显差别,二者形态学也未见明显差异.重组BCG作用于肿瘤细胞后可见细胞表面微绒毛减少,胞质内线粒体肿胀,空泡样变性,核染色质溶解,细胞质坏死.重组BCG对两种细胞的抑制率都显著高于野生BCG(P<0.05).结论 重组hIFN-α-2B-BCG的分泌性表达持续稳定,其生长和形态特征与野生型基本一致.重组BCG体外对肿瘤细胞的抑制杀伤作用强于野生BCG.
作者：孙二琳；刘春雨；韩瑞发；范晓东
来源：中华微生物学和免疫学杂志 2010 年 30卷 1期
