目的 构建分泌表达人共刺激分子B7-2(hB7-2)的重组卡介苗(rBCG).方法 采用聚合酶链反应(PCR)以含hB7-2的质粒为模板扩增出hB7-2活性序列,利用基因重组技术插入pYL-MCS质粒构建出分泌型卡介苗穿梭表达载体pYL-hB7-2.用电穿孔方法将该质粒转入卡介苗得到rBCG,利用PCR扩增和测序检测其hB7-2的DNA表达,分别SDS-PAGE和ELISA法测定rBCG上清液中和菌内hB7-2蛋白.结果 酶切鉴定、PCR扩增和DNA测序均表明rBCG含有的hB7-2 DNA与文献结果一致,SDS-PAGE检测出有相应蛋白表达,ELISA法测定rBCG上清液中分泌的B7-2蛋白为3.8 U/ml.结论 构建的重组BCG可以分泌表达人共刺激分子hB7-2,能够提供激活免疫反应的共刺激信号,将会成为膀胱肿瘤免疫治疗的一种新型方法.
作者：王靖宇；韩瑞发；马腾骧；王东文
来源：中国医药 2009 年 4卷 12期
