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目的 从分子水平检定b型流感嗜血杆菌,研究不同菌株荚膜多糖结合物的免疫原性.方法 提取基因组,通过型特异和荚膜型基因特异引物,利用PCR检定b型流感嗜血杆菌;不同纯化多糖分别与破伤风类毒素(TT)进行耦联结合,结合物原液经稀释免疫小鼠,通过两针免疫,采血进行免疫效力测定.结果 5株b型流感嗜血杆菌通过PCR法均能获得预期大小的型特异(482 bp)和荚膜型(343 bp)基因片段,BLAST分析显示,各菌之间型特异和荚膜型序列比对,其同源性均为100%,各菌型特异和荚膜型序列分别与GenBank X78559.1和M19995.1序列比对,同源性分别为99%和100%;ELISA检测显示,4株不同菌株来源的荚膜多糖结合物(PRP-TT)的小鼠免疫效力差异无统计学意义.结论 通过PCR法从分子水平检定b型流感嗜血杆菌,纯化的不同荚膜多糖结合物小鼠免疫原性基本一致.可供不同Hib多糖结合物免疫原性的研究参考数据.

作者:袁玉兰;郭京蓉;周继唯;高华

来源:中华微生物学和免疫学杂志 2012 年 32卷 4期

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作者:
袁玉兰;郭京蓉;周继唯;高华
来源:
中华微生物学和免疫学杂志 2012 年 32卷 4期
标签:
流感嗜血杆菌 血清型特异基因 荚膜型基因 荚膜多糖 免疫原性 Haemophilus influenzae Sentype-specific gene Capsular type gene Capsular polysaccharide Immunogenicity
目的 从分子水平检定b型流感嗜血杆菌,研究不同菌株荚膜多糖结合物的免疫原性.方法 提取基因组,通过型特异和荚膜型基因特异引物,利用PCR检定b型流感嗜血杆菌;不同纯化多糖分别与破伤风类毒素(TT)进行耦联结合,结合物原液经稀释免疫小鼠,通过两针免疫,采血进行免疫效力测定.结果 5株b型流感嗜血杆菌通过PCR法均能获得预期大小的型特异(482 bp)和荚膜型(343 bp)基因片段,BLAST分析显示,各菌之间型特异和荚膜型序列比对,其同源性均为100%,各菌型特异和荚膜型序列分别与GenBank X78559.1和M19995.1序列比对,同源性分别为99%和100%;ELISA检测显示,4株不同菌株来源的荚膜多糖结合物(PRP-TT)的小鼠免疫效力差异无统计学意义.结论 通过PCR法从分子水平检定b型流感嗜血杆菌,纯化的不同荚膜多糖结合物小鼠免疫原性基本一致.可供不同Hib多糖结合物免疫原性的研究参考数据.