目的建立一种快速、敏感度高的实时荧光环介导等温定量检测HIV-1 DNA的方法。方法根据HIV病毒基因序列选择6个保守区域设计4条环介导等温扩增（ LAMP）引物，建立环介导等温扩增体系，同时在体系中加入SYBR GreenⅠ荧光染料，并评价该方法的特异性和敏感度。结果成功合成实时荧光环介导等温定量检测HIV-1 DNA反应体系，检测200例HIV感染者外周淋巴细胞HIV-1 DNA，其中有195例阳性，并检测50例健康对照结果均阴性。其中有HIV-1 DNA定量结果显示最低含量为51拷贝/ml，最高含量为8．21×106拷贝/ml，平均值含量为5．78×105拷贝/ml，其中病毒含量比较集中在105数量级范围，共162例占83．08％。采用10倍稀释法发现该方法最低检出限为50拷贝/ml。对乙型肝炎病毒、疱疹病毒、丙型肝炎病毒进行交叉实验结果均为阴性。结论HIV感染者外周血中几乎都存在HIV-DNA，实时荧光环介导等温扩增是一种快速、敏感度高、特异性强的方法，适合各级医院的临床检测。
作者：厉小玉；张永乐；潘克女；吴亦栋；陈刚；周俊
来源：中华微生物学和免疫学杂志 2013 年 8期
