目的:建立结核分枝杆菌(M ycobacterium tuberclu osis,Mtb)潜伏感染治疗用疫苗的豚鼠评价模型。方法豚鼠皮下攻毒5.0×103 CFU Mtb,于不同时间点用0.5μg重组结核杆菌ESAT6-CFP10蛋白对豚鼠皮试,观察皮试阳转情况。攻毒2周后,模型组豚鼠采用5 mg异烟肼灌胃治疗,每周3次,持续4周;对照组豚鼠不做化疗。在Mtb感染后的第6周,分别取未经异烟肼治疗的豚鼠和经异烟肼治疗的豚鼠解剖,比较豚鼠的肝、脾和肺的脏器综合病变指数以及脾活菌数( log10 CFU)。根据上述结果建立豚鼠的潜伏感染模型,并用两个参考疫苗对该模型进行验证。结果豚鼠攻毒Mtb 2周后,EC皮试反应全部转阳,皮试反应大小为(19.9±3.0) mm。模型组豚鼠经4周异烟肼治疗后,脏器综合病变指数为0,脾未分离出活菌数。对照组豚鼠不经化疗,脏器综合病变指数为38.8±16.5,脾活菌数为(5.1±0.3)log10 CFU。停药后,模型组豚鼠结核病自然复发,在两次参考疫苗的验证中,脏器综合病变指数分别为48.5±23.9和51.30±23.41,脾活菌数分别为(4.5±1.3)和(4.2±1.1) log10 CFU,肺部活菌数分别为(4.1±1.2)和(3.4±1.3) log10 CFU。结论 Mtb攻毒豚鼠后,异烟肼化疗可抑制Mtb增殖,成功建立豚鼠的Mtb潜伏感染
作者:卢锦标;邓海清;陈保文;都伟欣;杨蕾;沈小兵;苏城;徐苗;王国治
来源:中华微生物学和免疫学杂志 2013 年 12期