目的:探讨转录因子p53在登革病毒感染中的作用。方法用逆转录病毒载体介导的RNA干扰技术构建p53低表达的人肝癌细胞株HepG2,并采用Western blot 进行鉴定。设定野生组和干扰组,分别用2型登革病毒感染。采用Vero细胞噬斑法检测病毒滴度;间接免疫荧光检测病毒增殖;流式细胞术检测病毒感染后细胞凋亡;酶联免疫吸附试验检测IFN-β分泌。结果与野生组比较,干扰组p53表达明显下调,表明构建p53低表达的HepG2细胞株成功。登革病毒感染24 h后,干扰组病毒滴度比野生组高100倍;免疫荧光显示干扰组发绿色荧光的细胞数明显多于野生组,说明p53抑制了登革病毒的感染。但是,登革病毒感染24 h后两组凋亡细胞的数目并没有明显差异,而野生组IFN-β分泌量增加6倍。结论转录因子p53抑制登革病毒感染可能不是通过促进细胞凋亡,而是通过激活Ⅰ型干扰素通路来发挥作用。
作者:李国利;张俊磊;胡艳玲;孙厚良;石中全;李小山;刘佳;饶贤才;胡福泉
来源:中华微生物学和免疫学杂志 2014 年 4期