目的 建立快捷灵敏的季节性流感病毒PCR-ELISA检测技术.方法 根据甲型流感病毒M基因(M)、H1和H3亚型的HA基因(H1-HA、H3-HA)、乙型流感病毒的NS基因(B-NS)保守序列设计引物探针,通过生物素与地高辛的特异性标记,最后通过酶联免疫吸附试验(ELISA)判断PCR扩增的有无.结果 M、H1、H3、B-NS四个基因片段所能检测的最低拷贝数分别为:1.43?103、8.67?102、3.86?103、5.45?103拷贝/μl,其敏感度比普通PCR扩增提高了10倍,且不同流感病毒亚型之间、不同种属病毒之间均不存在交叉反应现象.另外还检测了104份临床标本,本文所建立的PCR-ELISA方法的检测结果与细胞培养完全一致.结论 本文通过特异性和敏感性实验显示此方法灵敏度高,特异性强,且操作简单,可以广泛地应用于流感病毒的实验室检测.
作者:章倩云;刘丹丹;焦永军;祁贤;宋勇春
来源:中华微生物学和免疫学杂志 2016 年 36卷 3期