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目的 探讨DNA识别受体环鸟苷酸-腺苷酸合成酶(cGAS)在成人T淋巴细胞白血病病毒1型(HTLV-1)感染HeLa细胞过程中的功能及其作用机制.方法 将HeLa细胞与MT2细胞(HTLV-1阳性T细胞)共培养,采用免疫印迹试验检测cGAS在HeLa细胞中的表达变化;构建带有血凝素(HA)标签的cGAS表达质粒,转染入HeLa细胞24 h后与MT2细胞共培养24 h,免疫印迹试验检测HeLa细胞中HTLV-1病毒蛋白Tax和p19的表达量,real-time PCR检测HeLa细胞中HTLV-1病毒基因Tax、p19、Env、HBZ以及px转录本的量,同时免疫印迹试验检测干扰素调节因子3(IRF3)和p65的磷酸化水平,real-time PCR检测干扰素(IFN)-β、干扰素诱导蛋白10(IP-10)、调节活化正常T细胞表达和趋化因子(RANTES)和肿瘤坏死因子(TNF)-α的表达量.结果 与MT2细胞共培养后,HeLa细胞中cGAS的表达升高;转染有cGAS表达质粒的HeLa细胞与对照组细胞相比,在与MT2细胞共培养后,Tax和p19在蛋白水平上的表达量减少,Tax、p19、EnV、HBZ以及px转录本的量减少,IRF3和p65的磷酸化水平升高,IFN-β、IP-10、RANTES和TNF-α的表达量增加.结论 cGAS在HTLV-1感染的HeLa细胞中可能具有促进固有免疫应答并抑制HTLV-1病毒复制的功能.

作者:马玲玲;郭志祥;宋迪;刘月;崔钰晗;关宇鹤;杨波;王洁

来源:中华微生物学和免疫学杂志 2017 年 37卷 11期

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作者:
马玲玲;郭志祥;宋迪;刘月;崔钰晗;关宇鹤;杨波;王洁
来源:
中华微生物学和免疫学杂志 2017 年 37卷 11期
标签:
环鸟苷酸-腺苷酸合成酶 成人T淋巴细胞白血病病毒1型 DNA识别受体 逆转录病毒 Cyclic GMP-AMP synthase ( cGAS) Human T cell leukemia virus type 1 ( HTLV-1) DNA sensor Retrovirus
目的 探讨DNA识别受体环鸟苷酸-腺苷酸合成酶(cGAS)在成人T淋巴细胞白血病病毒1型(HTLV-1)感染HeLa细胞过程中的功能及其作用机制.方法 将HeLa细胞与MT2细胞(HTLV-1阳性T细胞)共培养,采用免疫印迹试验检测cGAS在HeLa细胞中的表达变化;构建带有血凝素(HA)标签的cGAS表达质粒,转染入HeLa细胞24 h后与MT2细胞共培养24 h,免疫印迹试验检测HeLa细胞中HTLV-1病毒蛋白Tax和p19的表达量,real-time PCR检测HeLa细胞中HTLV-1病毒基因Tax、p19、Env、HBZ以及px转录本的量,同时免疫印迹试验检测干扰素调节因子3(IRF3)和p65的磷酸化水平,real-time PCR检测干扰素(IFN)-β、干扰素诱导蛋白10(IP-10)、调节活化正常T细胞表达和趋化因子(RANTES)和肿瘤坏死因子(TNF)-α的表达量.结果 与MT2细胞共培养后,HeLa细胞中cGAS的表达升高;转染有cGAS表达质粒的HeLa细胞与对照组细胞相比,在与MT2细胞共培养后,Tax和p19在蛋白水平上的表达量减少,Tax、p19、EnV、HBZ以及px转录本的量减少,IRF3和p65的磷酸化水平升高,IFN-β、IP-10、RANTES和TNF-α的表达量增加.结论 cGAS在HTLV-1感染的HeLa细胞中可能具有促进固有免疫应答并抑制HTLV-1病毒复制的功能.