目的:探究长链非编码RNA (lncRNA)ZNF667-AS1通过靶向miR-31- 5p对食管癌细胞增殖和迁移的影响及潜在的机制。方法:采用实时荧光定量PCR(qPCR)技术检测ZNF667-AS1在食管癌细胞Eca109、EC1、TE1和正常食管上皮细胞Het- 1A的表达水平,并选择表达差异最大的细胞株进行后续实验。采用脂质体转染技术将pcDNA3.1- ZNF667-AS1过表达重组载体质粒转染至人食管癌Eca109细胞,实验分为对照组(未行转染的Eca109细胞)、pcDNA3.1组(转染空载体质粒的Eca109细胞)和ZNF667- AS1组(转染pcDNA3.1- ZNF667- AS1质粒的Eca109细胞),qPCR技术检测pcDNA3.1- ZNF667-AS1的转染效果,噻唑蓝比色法(MTT)和平板克隆实验检测过表达ZNF667-AS1对Eca109细胞增殖能力的影响,Transwell实验检测Eca109细胞迁移能力,流式细胞术检测Eca109细胞凋亡率,Western blot检测Eca109细胞中G1/S-特异性周期蛋白-D1(Cyclin D1)、细胞周期依赖性激酶抑制因子(p21)、上皮标志物上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)、间充质标志物神经型钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、B细胞淋巴瘤/白血病-2相关蛋白X(Bax)和B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)的表达水平,生物信息学预测ZNF667- AS1与miR- 31-5p的互补配对关系,荧光素酶报
作者:邱卫明;王建荣;徐志敏;缪玖麟;陈保华;汪芝珍
来源:中华细胞与干细胞杂志(电子版) 2021 年 11卷 1期