目的:探讨circSERPINE2对缺氧/复氧(H/R)诱导的心肌细胞损伤的影响及机制。方法:体外培养大鼠心肌细胞H9c2,分为对照组(用常规培养基置于常规培养箱中培养7 h)、H/R组[无血清低糖DMEM培养基缺氧(不含氧)培养3 h后,10﹪ FBS的DMEM培养基复氧(19.95﹪氧)培养4 h]、H/R+pcDNA组(转染pcDNA至H9c2细胞后进行H/R处理)、H/R+pcDNA-circSERPINE2组(转染pcDNA-circSERPINE2至H9c2细胞后进行H/R处理)、H/ R+anti-miR-NC组(转染anti-miR-NC至H9c2细胞后进行H/R处理)、H/R+anti-miR- 106b- 5p组(转染anti-miR-106b-5p至H9c2细胞后进行H/R处理)、H/R+pcDNA- circSERPINE2+ miR-NC组(共转染pcDNA-circSERPINE2和miR-NC至H9c2细胞后进行H/R处理)和H/ R+pcDNA-circSERPINE2+miR-106b-5p组(共转染pcDNA- circSERPINE2和miR- 106b- 5p mimics至H9c2细胞后进行H/R处理)。用RT-qPCR法检测细胞中circSERPINE2和miR- 106b- 5p表达,流式细胞术检测细胞凋亡,免疫印迹法检测细胞中cleaved caspase-3和cleaved caspase-9蛋白表达,试剂盒检测细胞中MDA含量、SOD和GSH-Px活性。双荧光素酶报告基因实验检测circSERPINE2和miR-106b-5p调控关系。方差齐性,两组间比较用t检验;方差不齐,两组间比较用t’检验。
作者:魏薇;王文斌;刘秀梅
来源:中华细胞与干细胞杂志(电子版) 2021 年 11卷 5期