目的 研究氯化钴模拟缺氧对RNA干扰的缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)基因表达及功能的影响,观察在人食管鳞癌细胞系Eca-109中RNA干扰抑制HIF-1α的效果.方法 选择4组细胞分别为食管癌Eca-109细胞和3株稳定转染HIF-1α SiRNA的Eca-109细胞(本实验室编号分别为H2/14号、H3/15号、H2/20号细胞),分别用200、400、600、800 μmol/L氯化钴模拟缺氧,缺氧培养时间分别为12、24、48、72 h,采用Western印迹和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测HIF-1α蛋白及mRNA表达,同时Western印迹检测血红素加氧酶(HO-1)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、葡萄糖转运体-1(Glut-1)、P53等相关基因的表达.结果 4组细胞HIF-1α蛋白表达均随氯化钴浓度加大而增加,常氧与400 μmol/L氯化钴处理24 h后筛选出H3/15号细胞HIF-1α蛋白表达最少,与其它3组相比差异有统计学意义(P＜0.05),mRNA检测差异无统计学意义;干扰细胞常氧下HO-1、MMP-2、Glu-1、P53表达不同程度减少,缺氧后HO-1、53表达增加,MMP-2、Glut-1表达无明显变化.结论 RNA干扰能抑制Eca-109细胞的HIF-1α基因表达,从而不同程度减少HO-1、MMP-2、Glut-1、P53等相关基因表达;经氯化钴模拟缺氧筛选出干扰效果较好的一株细胞,为进一步研究HIF-1α的功能奠定了基础.

作者：张捷；施瑞华；肖斌；杜琰萍；张国新；郝波

来源：中华消化内镜杂志 2007 年 24卷 1期