目的 探讨正常上皮细胞特异性1基因(NES1)在胃正常上皮细胞和胃癌细胞株中的表达及其受甲基化调控的影响.方法 分别培养胃癌细胞株MKN-28(高分化)、SGC-7901(中分化)、AGS(中分化)、MKN-45(低分化)、HGC-27(未分化)和原代正常胃上皮细胞.提取细胞RNA,荧光定量PCR检测NES1在各细胞株中的表达.以不同浓度的DNA甲基化酶抑制剂5'-杂氮-2'-脱氧胞嘧啶(5-aza-dC)处理胃癌细胞株,荧光定量PCR检测处理后NES1mRNA表达.同时提取细胞基因组DNA,甲基化修饰后甲基特异性PCR(MSP)分析其CpG岛甲基化状态.结果 NES1mRNA在肿瘤细胞株中的表达较胃正常上皮细胞明显降低.甲基化检测显示,NES1在胃癌细胞株中均存在不同程度的外显子3 CpG岛甲基化.NES1表达降低的胃癌细胞株经5-aza-dC去甲基化药物处理后NES1表达均有所上调.结论 NES1在一些胃癌细胞株中的低表达与该基因外显子3 CpG岛甲基化有关.5-aza-dC可使NES1表达降低的胃癌细胞株重新表达NES1mRNA,再次证明了NES1基因在胃癌细胞株中的低表达与甲基化有关.NES1基因外显子3甲基化可能是胃癌细胞中NES1表达缺失的分子机制
作者:黄玮;钟捷;吴云林;张一帆;李彪
来源:中华消化杂志 2006 年 28卷 8期