目的 探讨肝细胞核因子1α(HNF1α)对肝癌HuH7细胞基因表达谱的影响及其对相关信号通路的调控作用.方法 利用慢病毒介导上调或下调HuH7细胞中HNF1α的表达,基因芯片技术检测处理后细胞的表达谱,筛选受HNF1α调控的差异基因并利用DAVID软件和相关分析系统进行信号通路归属分析;报告基因实验检测HNF1α对TGFβ信号通路的调控作用,同时利用实时荧光定量PCR和Western印迹法检测HNF1α对TGFβ信号通路相关基因的调控作用.结果 在HuH7细胞中,携带HNF1α基因的慢病毒Lenti-HNF1α可显著上调HNF1α表达,而含有静默HNF1α表达片段的慢病毒Lenti-shHNF1α可下调其表达.基因芯片结果显示,受HNF1α正向调控差异2倍以上的基因有339个,负向调控差异2倍以上的基因有325个.差异基因信号通路归属分析表明,HNF1α能够调控药物代谢、不饱和脂肪酸的合成、糖酵解/糖异生等代谢相关信号通路,同时还参与调控TGFβ、NF-κB、p53等肿瘤相关信号通路.荧光素酶报告基因实验表明,上调HNF1α能够抑制TGFβ信号通路活化;同时实时荧光定量PCR和Western印迹法证实,上调HNF1α能够抑制TGFβ信号通路相关基因c-myc和TGFβ1基因的表达,从而抑制该信号通路的活化.结论 HNF1α对HuH7细胞的基因表达谱和肿瘤发生、发展相关信号通路具有广泛影响
作者：丁晨虹；邓龙飞；王剑；谢渭芬；张新
来源：中华消化杂志 2015 年 35卷 3期
