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目的:初步探讨金雀异黄素提高结肠癌细胞对5-氟尿嘧啶(5-FU)的敏感性,促进结肠癌细胞凋亡的分子机制。方法选择 SW480结肠癌细胞株为实验对象,将金雀异黄素80μmol/L 和5-FU 30μg/mL 单用或联用48 h 作为药物实验组,另设不加药组为对照组。分别采用实时定量 PCR 和Western 印迹法检测各组细胞的生存素、Bcl-2、p21、caspase3和 caspase 9基因和蛋白表达情况。采用比较阈值法(2-ΔΔCT 法)来确定基因的相对表达量。以β-actin 作为内参照,进行半定量分析计算蛋白相对表达量。电泳迁移率改变分析(EMSA)检测各组细胞 NF-κB 的 DNA 结合活性。多组间样本均数比较采用单因素方差分析,组间两样本均数比较采用 LSD 检验。结果联合用药组的 caspase3、caspase9和p21基因表达(1.903±0.122、2.726±0.050、2.541±0.393)与蛋白表达(0.534±0.077、1.161±0.172、0.463±0.016)高于对照组(1.001±0.052、1.000±0.014、1.001±0.037和0.080±0.043、0.248±0.059、0.139±0.021)、金雀异黄素组(1.559±0.038、2.394±0.095、1.686±0.061和0.335±0.052、0.478±0.059、0.304±0.018)和5-FU 组(1.198±0.063、1.051±0.043、1.399±0.055和0

作者:凌航;陈裕庆;高美钦;张文敏

来源:中华消化杂志 2015 年 6期

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作者:
凌航;陈裕庆;高美钦;张文敏
来源:
中华消化杂志 2015 年 6期
标签:
金雀异黄素 氟尿嘧啶 结肠肿瘤 凋亡 机制 Genistein Fluorouracil Colonic neoplasms Apoptosis Mechanism
目的:初步探讨金雀异黄素提高结肠癌细胞对5-氟尿嘧啶(5-FU)的敏感性,促进结肠癌细胞凋亡的分子机制。方法选择 SW480结肠癌细胞株为实验对象,将金雀异黄素80μmol/L 和5-FU 30μg/mL 单用或联用48 h 作为药物实验组,另设不加药组为对照组。分别采用实时定量 PCR 和Western 印迹法检测各组细胞的生存素、Bcl-2、p21、caspase3和 caspase 9基因和蛋白表达情况。采用比较阈值法(2-ΔΔCT 法)来确定基因的相对表达量。以β-actin 作为内参照,进行半定量分析计算蛋白相对表达量。电泳迁移率改变分析(EMSA)检测各组细胞 NF-κB 的 DNA 结合活性。多组间样本均数比较采用单因素方差分析,组间两样本均数比较采用 LSD 检验。结果联合用药组的 caspase3、caspase9和p21基因表达(1.903±0.122、2.726±0.050、2.541±0.393)与蛋白表达(0.534±0.077、1.161±0.172、0.463±0.016)高于对照组(1.001±0.052、1.000±0.014、1.001±0.037和0.080±0.043、0.248±0.059、0.139±0.021)、金雀异黄素组(1.559±0.038、2.394±0.095、1.686±0.061和0.335±0.052、0.478±0.059、0.304±0.018)和5-FU 组(1.198±0.063、1.051±0.043、1.399±0.055和0