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目的阐明有丝分裂源激活的蛋白激酶(MAPK)和磷脂酶C(PLC)通路在调节细胞周期素依赖性激酶抑制因子(CKI)p27,p21,p57蛋白表达量中的作用及其对血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的影响.方法分离SD大鼠主动脉中层平滑肌,贴壁法培养平滑肌细胞,无血清培养基培养静止后,分别加入血小板源性生长因子(PDGF)(20 ng/ml)、PDGF+PD98059(20 ng/ml +20 mmol/L)、PDGF+硫酸新霉素(20 ng/ml+10 mmol/L)等刺激因素,以无血清培养基培养的VSMC作对照.在刺激后90 min收集细胞,用免疫沉淀法检测MAPK(p44/p42)活性的改变.在刺激后6和24 h收集细胞,用Western蛋白印迹法检测p27、p57和p21蛋白表达量.结果 PDGF刺激后,MAPK活性明显升高(较对照组增加46.6

作者:许顶立;刘煜;汪明慧;欧阳平;赖文岩

来源:中华心血管病杂志 2003 年 31卷 4期

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作者:
许顶立;刘煜;汪明慧;欧阳平;赖文岩
来源:
中华心血管病杂志 2003 年 31卷 4期
标签:
细胞 肌,平滑,血管 有丝分裂素激活蛋白激酶类 磷脂酶C 细胞周期蛋白依赖激酶类
目的阐明有丝分裂源激活的蛋白激酶(MAPK)和磷脂酶C(PLC)通路在调节细胞周期素依赖性激酶抑制因子(CKI)p27,p21,p57蛋白表达量中的作用及其对血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的影响.方法分离SD大鼠主动脉中层平滑肌,贴壁法培养平滑肌细胞,无血清培养基培养静止后,分别加入血小板源性生长因子(PDGF)(20 ng/ml)、PDGF+PD98059(20 ng/ml +20 mmol/L)、PDGF+硫酸新霉素(20 ng/ml+10 mmol/L)等刺激因素,以无血清培养基培养的VSMC作对照.在刺激后90 min收集细胞,用免疫沉淀法检测MAPK(p44/p42)活性的改变.在刺激后6和24 h收集细胞,用Western蛋白印迹法检测p27、p57和p21蛋白表达量.结果 PDGF刺激后,MAPK活性明显升高(较对照组增加46.6