目的 研究微小RNA-133a(miR-133a)对L-型钙通道α1C亚基的调控作用及其对心肌细胞肥大的影响.方法 培养乳鼠心肌细胞,异丙肾上腺素(ISO)诱导心肌细胞肥大.相差显微镜和Leica图像分析软件测量心肌细胞表面积.逆转录实时定量PCR(qRT-PCR)和Western blot法分别检测心房钠尿肽(ANP)、β-肌球蛋白重链(β-MHC)、miR-133a和α1C mRNA和蛋白表达水平.转染miR-133a模拟物(mimic)上调心肌细胞miR-133a表达,观察对心肌细胞肥大的影响.应用网络数据库Targetscan预测miR-133a的靶基因.构建含α1C 3'UTR报告基因质粒和miR-133a瞬时共转染HEK293细胞,验证α1C为miR-133a靶基因.应用α1C RNAi干扰α1C蛋白表达,明确α1C亚基在心肌细胞肥大中的作用.应用激光共聚焦显微镜检测心肌细胞内钙离子浓度.结果 (1)在ISO诱导的心肌细胞肥大过程中,miR-133a表达显著下降(P＜0.01).miR-133a mimic转染心肌细胞上调miR-133a表达,心肌细胞表面积、ANP和β-MHC mRNA表达均明显降低(P均＜0.01).(2)网络数据库预测显示α1C为miR-133a的潜在靶点.将miR-133a和含α1C 3'UTR报告基因共转染HEK293细胞,其荧光值显著降低(P＜0.01).转染miR-133a mimic使心肌细胞miR-133a表达上调,可明显抑制α1C蛋白的表达(P＜0.05).(3)在ISO诱导心肌细胞肥大

作者：吴扬；王玉琴；王宝霞

来源：中华心血管病杂志 2013 年 41卷 6期