目的利用人类端粒酶逆转录酶(hTERT)基因反义寡核苷酸(ASODN)抑制K562细胞端粒酶活性后,探讨顺铂对K562细胞凋亡的影响.方法采用聚合酶链反应-酶联免疫吸附法(PCR-ELISA)检测端粒酶活性的变化;以间接免疫荧光标记法通过流式细胞仪检测hTERT蛋白表达含量的变化.琼脂糖凝胶电泳分析细胞凋亡的DNA断裂;用流式细胞仪对细胞凋亡峰进行定量分析.结果hTERT基因ASODN作用于K562细胞后,hTERT蛋白的表达水平及端粒酶活性下降;ASODN作用于K562细胞24h再加入顺铂作用72 h,经琼脂糖凝胶电泳即可见到DNA梯形条带,而正义寡核苷酸(SODN)与顺铂联合作用组及单独应用顺铂均未见到明显的DNA梯形条带.hTERT基因ASODN作用于K562细胞24h,再加入5μmol/L顺铂作用48,72h的凋亡细胞百分率(17.43
作者:何冬梅;张洹
来源:中华血液学杂志 2001 年 22卷 7期