目的探索骨髓基质细胞用于血友病A基因治疗的可能性.方法采用一包含了B区缺失(△760aa～1?639aa)的人凝血因子Ⅷ cDNA(FⅧ△B cDNA)的复制缺陷型重组逆转录病毒LNC-FⅧ△B,在低温(32?℃)和离心等改进条件下转化体外分离培养的小鼠和兔骨髓基质细胞.分别采用一期法、ELISA法和半定量PCR方法检测细胞培养上清中人FⅧ的凝血活性(FⅧ:C)和抗原含量(FⅧ:Ag)以及骨髓基质细胞的基因转化效率.并对转化细胞表达的FⅧ蛋白进行Western blot分析.结果与标准方法相比,离心和32 ℃转化使小鼠骨髓基质细胞的基因转染效率提高50
作者：郭雪梅；王鸿利；储海燕；王学锋；遽斌；尹俊；康文英；段宝华；王振义；戚正武
来源：中华血液学杂志 2001 年 22卷 9期
