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目的 探讨造血发育过程中Wnt和Notch信号通路参与造血微环境调控造血的机制.方法 磁珠分选法分离小鼠骨髓c-kit~+造血干/祖细胞(HSPC).贴壁培养法分离小鼠孕10.5 d主动脉-中肾-肾上腺(AGM)区,孕12.5 d、14.5 d、16.5 d胎肝以及骨髓来源的基质细胞.通过Transwell共培养以及流式细胞术计数,比较不同来源基质细胞支持HSPC增殖的能力.通过实时定量PCR和免疫荧光动态检测各发育阶段基质细胞中Wnt、Notch Mrna和蛋白的表达.结果 体外培养7 d,AGM区和胎肝基质细胞培养体系中c-kit~+细胞数由0.4×10~5/孔分别扩增为(19.2±3.2)×10~5/孔和(26.8±5.4)×10~5/孔,明显高于骨髓基质细胞培养体系的(9.6 ± 2.9)×10~5/孔(P<0.05);其中,AGM区和骨髓基质细胞培养体系中c-kit~+细胞比例分别为(75.2 ± 7.1)

作者:周琨;胡采红;黄丽芳;刘文励;孙汉英

来源:中华血液学杂志 2009 年 30卷 12期

知识库介绍

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作者:
周琨;胡采红;黄丽芳;刘文励;孙汉英
来源:
中华血液学杂志 2009 年 30卷 12期
标签:
基因 Wnt 基因 Notch 造血微环境 造血干细胞 造血调控 Gene Wnt Gene Notch Microenvironment Hematopoietic stem cell Hematopoietic regulation
目的 探讨造血发育过程中Wnt和Notch信号通路参与造血微环境调控造血的机制.方法 磁珠分选法分离小鼠骨髓c-kit~+造血干/祖细胞(HSPC).贴壁培养法分离小鼠孕10.5 d主动脉-中肾-肾上腺(AGM)区,孕12.5 d、14.5 d、16.5 d胎肝以及骨髓来源的基质细胞.通过Transwell共培养以及流式细胞术计数,比较不同来源基质细胞支持HSPC增殖的能力.通过实时定量PCR和免疫荧光动态检测各发育阶段基质细胞中Wnt、Notch Mrna和蛋白的表达.结果 体外培养7 d,AGM区和胎肝基质细胞培养体系中c-kit~+细胞数由0.4×10~5/孔分别扩增为(19.2±3.2)×10~5/孔和(26.8±5.4)×10~5/孔,明显高于骨髓基质细胞培养体系的(9.6 ± 2.9)×10~5/孔(P<0.05);其中,AGM区和骨髓基质细胞培养体系中c-kit~+细胞比例分别为(75.2 ± 7.1)