目的 探索脐血来源单个核细胞体外诱导分化为粒系细胞的方法.方法 采用羟乙基淀粉沉降红细胞,淋巴细胞分离液分离单个核细胞.选择不同的培养基、添加剂以及培养模式诱导粒系细胞分化,显微镜观察细胞形态,流式细胞术检测细胞表型,免疫荧光测定粒系细胞CD18表达,并检测细胞吞噬功能.结果 采用X-VIVOTM15中添加细胞因子TPO、SCF、G-CSF诱导粒系细胞,细胞存活率、细胞数、粒系细胞分化效率均优于添加胎牛血清组.与SCGM培养基诱导粒系细胞相比,X-VIVOTM15培养基效果更佳,且成本低.采用造血干细胞扩增和在基础培养基X-VIVOTM15中添加细胞因子TPO、SCF、G-CSF诱导粒系细胞的两阶段扩增、诱导模式,21d细胞扩增倍数近132倍;流式细胞术检测表明,粒系细胞分化效率滞后于直接诱导模式,粒系标志CD15表达分别为(69.60士1.06)％和(97.73士0.39)％;瑞氏-吉姆萨染色可见成熟的分叶核粒细胞;免疫荧光方法检测显示溶酶体蛋白CD18的表达;成熟的粒细胞具有较强吞噬墨汁的功能,吞噬效率为(51.43±0.05)％.且在细胞趋化因子IL-8作用下,粒细胞具有趋化作用.结论 优化了诱导粒系细胞培养体系和培养模式,获得了具有一定功能的粒系细胞.
作者：陈琳；谢小燕；聂纪芹；陈东丽；黄安平；房芳；曲洺逸；南雪；何丽娟；范增；岳文；裴雪涛
来源：中华血液学杂志 2017 年 38卷 6期
