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目的探讨抗凋亡基因bcl-2表达对体外培养的葡萄膜黑色素瘤(uveal melanoma,UM)细胞存活的影响.方法通过阳离子脂质体将bcl-2反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotides,AS-ODN)转导原代培养UM细胞,应用噻唑蓝(3,-4,5 Dimethyliazol -2,5 diphenyl tetrazolium bromide,MTT)法测定bcl-2 AS-ODN对肿瘤细胞增生的抑制作用;提取肿瘤细胞DNA,检测肿瘤细胞的凋亡情况;利用逆转录聚合酶链式反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)和蛋白印迹(Westernblot)技术,从RNA及蛋白水平测定bcl-2 AS-ODN对肿瘤细胞bcl-2表达的影响.结果 bcl-2 AS-ODN对UM细胞的增生有明显抑制作用,并且其抑制作用随浓度的增高而增强.bcl-2 AS-ODN在mRNA及蛋白水平对bcl-2基因表达产生明显抑制作用,而正义寡核苷酸(sense oligodeoxynucleotides,S-ODN)对肿瘤细胞的增生则无明显的抑制作用.结论 bcl-2 AS-ODN在转录和翻译水平下调bcl-2基因表达,抑制UM细胞增生并诱导其凋亡.

作者:郭琳洁;吴中耀;张胜;毛羽翔;郑湖玲;郑健樑

来源:中华眼底病杂志 2002 年 18卷 1期

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作者:
郭琳洁;吴中耀;张胜;毛羽翔;郑湖玲;郑健樑
来源:
中华眼底病杂志 2002 年 18卷 1期
标签:
葡萄膜肿瘤 黑色素瘤 寡核苷酸类 体外研究 细胞死亡
目的探讨抗凋亡基因bcl-2表达对体外培养的葡萄膜黑色素瘤(uveal melanoma,UM)细胞存活的影响.方法通过阳离子脂质体将bcl-2反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotides,AS-ODN)转导原代培养UM细胞,应用噻唑蓝(3,-4,5 Dimethyliazol -2,5 diphenyl tetrazolium bromide,MTT)法测定bcl-2 AS-ODN对肿瘤细胞增生的抑制作用;提取肿瘤细胞DNA,检测肿瘤细胞的凋亡情况;利用逆转录聚合酶链式反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)和蛋白印迹(Westernblot)技术,从RNA及蛋白水平测定bcl-2 AS-ODN对肿瘤细胞bcl-2表达的影响.结果 bcl-2 AS-ODN对UM细胞的增生有明显抑制作用,并且其抑制作用随浓度的增高而增强.bcl-2 AS-ODN在mRNA及蛋白水平对bcl-2基因表达产生明显抑制作用,而正义寡核苷酸(sense oligodeoxynucleotides,S-ODN)对肿瘤细胞的增生则无明显的抑制作用.结论 bcl-2 AS-ODN在转录和翻译水平下调bcl-2基因表达,抑制UM细胞增生并诱导其凋亡.