目的 观察肽聚糖(PGN)对树突细胞(DCs)分泌促炎性细胞因子的影响以及对实验性自身免疫性葡萄膜炎(EAU)辅助性T细胞(Th)17(Th17细胞)反应的调控.方法 利用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子、白细胞介素(IL)-4(IL-4)定向诱导健康小鼠骨髓细胞向DCs分化.诱导分化的第6天将DCs分为对照组与实验组,实验组加入PGN干预,对照组加入等量无菌磷酸缓冲盐溶液,培养24 h后利用实时荧光逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,检测2组培养细胞中Th17细胞分化相关的细胞因子IL-23、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-6、IL-1β mRNA相对表达量.采用光感受器间维生素A类结合蛋白(IRBP) 1-20多肽片段(IRBP1-20)和弗氏不完全佐剂及结核分枝杆菌H37RA免疫C57BL/6小鼠.免疫后13d分离EAU模型鼠脾脏和淋巴结的IRBP1-20特异的T细胞与经PGN干预或未干预的DCs共培养.收集共培养后2d的细胞,实时荧光RT-PCR检测维甲酸相关孤儿受体γt(RORγt)、IL-17、T-bet、γ干扰素(IFN-γ)mRNA相对表达量;此外,收集共培养后2、5、7d的细胞分别进行流式细胞仪分析,观察Th17、Th1细胞的变化.结果 实时荧光RT-PCR检测结果显示,实验组DCs经PGN干预后IL-23、IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA相对表达量较对照组显著升高,差异有统计学意义(t=-14.363、-5.627、-3.85、-28.151;P
作者:肖青;粘红;魏瑞华;张晓敏;李雪;刘勋;李筱荣
来源:中华眼底病杂志 2013 年 29卷 6期