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目的 观察丁基苯酞(NBP)对过氧化氢(H2O2)诱导下视网膜Müller细胞凋亡的保护作用.方法 体外培养的人视网膜Müller细胞分为正常对照组、模型组(H2O2组)、实验组(H2O2+NBP组).H2O2组、H2O2+NBP组细胞培养液中加入200 μmol/LH2O2刺激2h后,H2O2组更换为完全培养基,H2O2+NBP组更换为含l μmol/L NBP的完全培养基.正常对照组为常规培养细胞.苏木精-伊红(HE)染色观察各组细胞形态改变;噻唑蓝(MTT)比色法检测NBP作用24、48 h后各组细胞活性;Hoechst33258染色观察各组细胞凋亡情况;LIVE/DEAD(R)细胞活性/细胞毒性试剂盒检测各组细胞生存力;二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)+内质网(ER)红色荧光探针(ER-Tracker Red)双染色观察各组细胞ER中活性氧(ROS)的表达水平.单因素方差分析联合Dunnett统计学方法进行数据分析.结果 HE染色结果显示,H2O2+NBP组细胞数量较H2O2组增加.MTT比色法检测结果发现,NBP作用24、48 h后,正常对照组与H2O2组、H2O2组与H2O2+NBP组细胞生存力比较,差异均有统计学意义(t=28.96、3.658、47.58、20.33,P<0.001、0.022).Hoechst33258结果显示,H2O2+NBP组细胞少数细胞核边集呈新月状且细胞核碎裂减少,其余细胞蓝色荧光均匀.LIVE/DEAD@细胞活性/细胞毒性试剂盒检测结果显示,H2O2组中呈红色荧光的死

作者:邢小丽;黄亮瑜;苏睿虹;刘勋;赵今稚;高美子;张晓敏;李筱荣;东莉洁

来源:中华眼底病杂志 2018 年 34卷 5期

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邢小丽;黄亮瑜;苏睿虹;刘勋;赵今稚;高美子;张晓敏;李筱荣;东莉洁
来源:
中华眼底病杂志 2018 年 34卷 5期
标签:
丁基苯酞 氧化应激 细胞凋亡 过氧化氢 Müller细胞 Butylphthalide Oxidative stress Apoptosis Hydrogen peroxide Müller cells
目的 观察丁基苯酞(NBP)对过氧化氢(H2O2)诱导下视网膜Müller细胞凋亡的保护作用.方法 体外培养的人视网膜Müller细胞分为正常对照组、模型组(H2O2组)、实验组(H2O2+NBP组).H2O2组、H2O2+NBP组细胞培养液中加入200 μmol/LH2O2刺激2h后,H2O2组更换为完全培养基,H2O2+NBP组更换为含l μmol/L NBP的完全培养基.正常对照组为常规培养细胞.苏木精-伊红(HE)染色观察各组细胞形态改变;噻唑蓝(MTT)比色法检测NBP作用24、48 h后各组细胞活性;Hoechst33258染色观察各组细胞凋亡情况;LIVE/DEAD(R)细胞活性/细胞毒性试剂盒检测各组细胞生存力;二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)+内质网(ER)红色荧光探针(ER-Tracker Red)双染色观察各组细胞ER中活性氧(ROS)的表达水平.单因素方差分析联合Dunnett统计学方法进行数据分析.结果 HE染色结果显示,H2O2+NBP组细胞数量较H2O2组增加.MTT比色法检测结果发现,NBP作用24、48 h后,正常对照组与H2O2组、H2O2组与H2O2+NBP组细胞生存力比较,差异均有统计学意义(t=28.96、3.658、47.58、20.33,P<0.001、0.022).Hoechst33258结果显示,H2O2+NBP组细胞少数细胞核边集呈新月状且细胞核碎裂减少,其余细胞蓝色荧光均匀.LIVE/DEAD@细胞活性/细胞毒性试剂盒检测结果显示,H2O2组中呈红色荧光的死