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目的探讨针对人血管内皮生长因子(VEGF)的短发夹RNA(shRNA)在体外对视网膜色素上皮(RPE)细胞VEGF表达的影响. 方法用酶辅助显微分离法分离人RPE细胞,并用细胞角蛋白和S-100进行免疫组化鉴定.设计针对人VEGF的短发夹RNA(shRNAs,P1,P2), P3为阴性对照即不含特异性shRNA,P1、P2退火后双链DNA连接到质粒pSilencer 4.1-CMV的BamHⅠ和Hind Ⅲ双酶切位点.转化细菌后,提取的质粒用EcoRⅠ和 SamⅠ进行酶切鉴定.实验分5组,第1组:RPE细胞中在含有100 μmol/L CoCl2,10

作者:蔡春梅;孙葆忱;刘旭阳

来源:中华眼科杂志 2006 年 42卷 4期

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作者:
蔡春梅;孙葆忱;刘旭阳
来源:
中华眼科杂志 2006 年 42卷 4期
标签:
RNA干扰 血管内皮生长因子A 色素上皮细胞,眼
目的探讨针对人血管内皮生长因子(VEGF)的短发夹RNA(shRNA)在体外对视网膜色素上皮(RPE)细胞VEGF表达的影响. 方法用酶辅助显微分离法分离人RPE细胞,并用细胞角蛋白和S-100进行免疫组化鉴定.设计针对人VEGF的短发夹RNA(shRNAs,P1,P2), P3为阴性对照即不含特异性shRNA,P1、P2退火后双链DNA连接到质粒pSilencer 4.1-CMV的BamHⅠ和Hind Ⅲ双酶切位点.转化细菌后,提取的质粒用EcoRⅠ和 SamⅠ进行酶切鉴定.实验分5组,第1组:RPE细胞中在含有100 μmol/L CoCl2,10