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目的 探讨衰老标记蛋白30(SMP-30)高表达对于紫外线B(UVB)诱导人晶状体上皮细胞凋亡的影响.方法 实验研究.以人晶状体上皮细胞系(HLE-B3)为模型,构建真核质粒pRFP-N1-SMP-30,利用脂质体转染的方法将其导入不同分组的细胞中,并以UVB刺激,用MTT法检测高表达的SMP-30对UVB诱导的HLE-B3细胞生存力的影响;利用细胞凋亡检测试剂盒测定高表达的SMP-30对UVB诱导的HLE-B3细胞凋亡的作用;并用免疫印迹法验证高表达的SMP-30对UVB诱导的凋亡相关蛋白表达的影响,通过活性氧自由基水平的检测分析高表达的SMP-30对UVB诱导的HLE-B3细胞活性氧表达的作用.数据的分析选择方差分析联合Dunnett的统计学方法.结果DNA测序证实插入的序列正确,证明pRFP-N1-SMP-30质粒构建成功.UVB照射后SMP-30高表达组HLE-B3细胞生存率为0.90±0.14,细胞的凋亡率为0.43±0.06,活性氧的水平0.52±0.02,与对照组相比差异均有统计学意义(t=5.830,9.934,12.19;P<0.05).UVB处理后,SMP-30高表达可显著下调Bax和cleav-caspase-3的表达,同时上调Bcl-2和Pro-caspase-3的表达.结论 高表达的SMP-30通过调控凋亡相关蛋白的表达及抑制活性氧的产生来缓解UVB照射导致的人晶状体上皮细胞的凋亡,从而发挥对晶状体上皮细胞的保护作用.

作者:滕贺;黄亮瑜;田芳;东莉洁;张红

来源:中华眼科杂志 2017 年 53卷 11期

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作者:
滕贺;黄亮瑜;田芳;东莉洁;张红
来源:
中华眼科杂志 2017 年 53卷 11期
标签:
晶体 上皮细胞 细胞凋亡 钙结合蛋白质类 胞间信号肽类和蛋白质类 紫外线 氧化性应激 Lens crystalline Epithelial cellse Apoptosise Calcium-binding proteinse Intercellular signaling peptides and proteinse Ultraviolet rayse Oxidative stress
目的 探讨衰老标记蛋白30(SMP-30)高表达对于紫外线B(UVB)诱导人晶状体上皮细胞凋亡的影响.方法 实验研究.以人晶状体上皮细胞系(HLE-B3)为模型,构建真核质粒pRFP-N1-SMP-30,利用脂质体转染的方法将其导入不同分组的细胞中,并以UVB刺激,用MTT法检测高表达的SMP-30对UVB诱导的HLE-B3细胞生存力的影响;利用细胞凋亡检测试剂盒测定高表达的SMP-30对UVB诱导的HLE-B3细胞凋亡的作用;并用免疫印迹法验证高表达的SMP-30对UVB诱导的凋亡相关蛋白表达的影响,通过活性氧自由基水平的检测分析高表达的SMP-30对UVB诱导的HLE-B3细胞活性氧表达的作用.数据的分析选择方差分析联合Dunnett的统计学方法.结果DNA测序证实插入的序列正确,证明pRFP-N1-SMP-30质粒构建成功.UVB照射后SMP-30高表达组HLE-B3细胞生存率为0.90±0.14,细胞的凋亡率为0.43±0.06,活性氧的水平0.52±0.02,与对照组相比差异均有统计学意义(t=5.830,9.934,12.19;P<0.05).UVB处理后,SMP-30高表达可显著下调Bax和cleav-caspase-3的表达,同时上调Bcl-2和Pro-caspase-3的表达.结论 高表达的SMP-30通过调控凋亡相关蛋白的表达及抑制活性氧的产生来缓解UVB照射导致的人晶状体上皮细胞的凋亡,从而发挥对晶状体上皮细胞的保护作用.