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目的应用基因工程技术,在昆虫细胞中表达SARS-CoV N基因,产生无感染性的核蛋白,作为诊断抗原,用于检测血清中SARS特异性抗体.方法从一例输入性SARS病人血清中提取病毒RNA,通过RT-PCR方法扩增SARS-CoV N基因,将它插入昆虫杆状病毒,构建重组昆虫杆状病毒,转染sf 9昆虫细胞,经丙酮固定,制成SARS特异性诊断抗原,建立检测病人血清抗SARS-CoV抗体的免疫荧光试验(immunofluorescence assay, IFA).结果此抗原仅与SARS阳性病人血清起反应,而与正常人及其他发热病人血清不起反应.经双盲试验,与空斑减少中和试验(plaque reduction neutralization test,PRNT)阳性的2003年SARS病人血清的符合率为97.8

作者:朱函坪;朱智勇;董关木;姚苹苹;安祺;翁景清;卢亦愚;徐芳;陆群英;严菊英;葛琼;龚黎明;史雯;李敏红;赵芝雅

来源:中华医学杂志 2005 年 85卷 9期

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作者:
朱函坪;朱智勇;董关木;姚苹苹;安祺;翁景清;卢亦愚;徐芳;陆群英;严菊英;葛琼;龚黎明;史雯;李敏红;赵芝雅
来源:
中华医学杂志 2005 年 85卷 9期
标签:
严重急性呼吸综合征 核蛋白类 杆状病毒科 荧光抗体技术,间接 冠状病毒,人
目的应用基因工程技术,在昆虫细胞中表达SARS-CoV N基因,产生无感染性的核蛋白,作为诊断抗原,用于检测血清中SARS特异性抗体.方法从一例输入性SARS病人血清中提取病毒RNA,通过RT-PCR方法扩增SARS-CoV N基因,将它插入昆虫杆状病毒,构建重组昆虫杆状病毒,转染sf 9昆虫细胞,经丙酮固定,制成SARS特异性诊断抗原,建立检测病人血清抗SARS-CoV抗体的免疫荧光试验(immunofluorescence assay, IFA).结果此抗原仅与SARS阳性病人血清起反应,而与正常人及其他发热病人血清不起反应.经双盲试验,与空斑减少中和试验(plaque reduction neutralization test,PRNT)阳性的2003年SARS病人血清的符合率为97.8