目的 探讨甲氨蝶呤(MTX)对映体耐药A549细胞的体外运动能力、浸润侵袭能力差异,从而说明MTX对映体在肿瘤细胞耐药后的侵袭转移过程中的差异.方法 采用浓度递增结合低剂量持续诱导,获得耐受15 μmol/L MTX对映体的细胞系,分别命名为L-(+)-MTX/A549、D-(-)-MTX/A549;用MTT法测定其耐药指数;通过平板划痕实验反映D-(-)-MTX/A549和L-(+)-MTX/A549细胞移动能力;采用双层软琼脂克隆形成实验检测D-(-)-MTX/A549组、L-(+)-MTX/A549组细胞的克隆形成率和集落形成的大小;应用transwell小室实验检测3组细胞体外侵袭能力.结果 L-(+)-MTX/A549、D-(-)-MTX/A549耐药指数分别为(6.1±1.0)和(20.3±1.8).平板划痕实验72 h后L-(+)-MTX/A549细胞进入划痕区的数量少于D-(-)-MTX/A549细胞;软琼脂实验发现D-(-)-MTX/A549组、L-(+)-MTX/A549组以及亲本细胞的集落数分别为(50±7)个克隆、(44±6)个克隆、(52±7)个克隆以及集落形成率分别为(1.68%±0.23%)、(1.49%±0.18%)、(1.73%±0.23%),3组之间差异无统计学意义(P>0.05),但D-(-)-MTX/A549组细胞的集落形状大小明显大于L-(+)-MTX/A549细胞;transwell小室检测D-(-)-MTX/A549、L-(+)-MTX/A549以及亲本细胞的体外浸润侵袭穿过人工基底膜Matrigel的细胞数分别为(267
作者:陶绍能;何晓东;沈佐君;董林
来源:中华医学杂志 2012 年 92卷 35期