目的 观察RNA干扰沉默P2X7受体(P2X7R)对小胶质细胞吞噬β淀粉样蛋白(Aβ)的影响并探讨其可能机制.方法 设计靶向P2X7R基因的小干扰RNA( siRNA).以脂质体lipofectamine 2000为转染剂将siP2X7R转入经β淀粉样蛋白激活的小胶质细胞,设为siP2X7R组;另设P2X7R阴性序列干扰组(siNC组)和空白对照组.用实时聚合酶链检测和Western印迹检测P2X7R的mRNA和蛋白表达,用ELISA检测小胶质细胞释放的白细胞介素(IL) 1β、肿瘤坏死因子(TNF)α含量,通过ELISA和免疫荧光染色观察小胶质细胞吞噬Aβ1-42的情况.结果 实时聚合酶链检测结果显示siP2X7R组P2X7R mRNA表达低于siNC组和空白对照组(P＜0.05).Western印迹检测显示P2X7R蛋白表达降低.ELISA检测显示siP2X7R组IL-1β和TNF-α含量低于空白对照组及siNC组(P＜0.05).ELISA检测结果显示siP2X7R组上清的Aβ1-42含量(296±30) pg/ml低于siNC组(417±16) pg/ml及空白对照组(423±20) pg/ml,而siP2X7R组小胶质细胞内的Aβ1-42含量(322±26) pg/ml高于siNC组(187±39)pg/ml及空白对照组(190±37)pg/ml,差异均有统计学意义(均P ＜0.05).Aβ1-42免疫荧光染色显示siP2X7R组大多数小胶质细胞胞质中见红色的阳性荧光产物;而siNC组、空白对照组只有少数小胶质细胞胞质中见红色荧光产物.

作者：倪炯；王培军

来源：中华医学杂志 2012 年 92卷 43期