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目的 分析血小板在缺氧-再氧化条件下对白细胞-肝窦内皮细胞间黏附和跨内皮迁移的影响及相关机制.方法 人肝窦内皮细胞(LSEC)经缺氧24 h、复氧2 h(HR)模拟肝脏缺血-再灌注(IRI)过程.将血小板和白细胞用荧光染料标记,通过荧光显微镜、连续光谱荧光仪及激光共聚焦显微镜检测细胞黏附和迁移情况;通过抗体阻断实验分析相关细胞黏附分子.结果 血小板在HR的LSEC上黏附明显增加,黏附的血小板的荧光强度为289.17±20.00,与正常培养组(142.10±7.53)相比差异有统计学意义(P<0.01).HR+ PLT组中黏附的血小板明显促进白细胞在HR的LSEC上的黏附,与HR组相比差异有统计学意义(360.71±23.47比186.39±17.96,P<0.01),这种白细胞黏附分别被抗黏附分子糖蛋白Ⅰ b(GP Ⅰ b)、糖蛋白Ⅱb(GPⅡb)、糖蛋白Ⅲa(GPⅢa)、P-选择素(P-selectin)、CD31、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)、内皮细胞白细胞黏附分子-1(ELAM-1)的抗体阻断.激光共聚焦显微镜显示,血小板位于白细胞与LSEC之间,介导白细胞与LSEC的黏附.HR+ PLT组添加的血小板抑制白细胞的跨内皮迁移,迁移白细胞的荧光强度为167.27±10.92,与HR组(227.79±16.51)相比差异有统计学意义(P<0.05).结论 缺氧-再氧化条件下,血小板黏附在肝窦内皮细胞表面,

作者:曹妍婷;娄晋宁;张文健;叶丽亚;刘虹麟;李成辉

来源:中华医学杂志 2013 年 93卷 13期

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作者:
曹妍婷;娄晋宁;张文健;叶丽亚;刘虹麟;李成辉
来源:
中华医学杂志 2013 年 93卷 13期
标签:
血小板 内皮细胞 白细胞 细胞黏附 再灌注损伤 肝窦 Blood platelet Endothelial cells Leukocytes Bacterial adhesion Reperfusion injury Liver sinusoidal
目的 分析血小板在缺氧-再氧化条件下对白细胞-肝窦内皮细胞间黏附和跨内皮迁移的影响及相关机制.方法 人肝窦内皮细胞(LSEC)经缺氧24 h、复氧2 h(HR)模拟肝脏缺血-再灌注(IRI)过程.将血小板和白细胞用荧光染料标记,通过荧光显微镜、连续光谱荧光仪及激光共聚焦显微镜检测细胞黏附和迁移情况;通过抗体阻断实验分析相关细胞黏附分子.结果 血小板在HR的LSEC上黏附明显增加,黏附的血小板的荧光强度为289.17±20.00,与正常培养组(142.10±7.53)相比差异有统计学意义(P<0.01).HR+ PLT组中黏附的血小板明显促进白细胞在HR的LSEC上的黏附,与HR组相比差异有统计学意义(360.71±23.47比186.39±17.96,P<0.01),这种白细胞黏附分别被抗黏附分子糖蛋白Ⅰ b(GP Ⅰ b)、糖蛋白Ⅱb(GPⅡb)、糖蛋白Ⅲa(GPⅢa)、P-选择素(P-selectin)、CD31、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)、内皮细胞白细胞黏附分子-1(ELAM-1)的抗体阻断.激光共聚焦显微镜显示,血小板位于白细胞与LSEC之间,介导白细胞与LSEC的黏附.HR+ PLT组添加的血小板抑制白细胞的跨内皮迁移,迁移白细胞的荧光强度为167.27±10.92,与HR组(227.79±16.51)相比差异有统计学意义(P<0.05).结论 缺氧-再氧化条件下,血小板黏附在肝窦内皮细胞表面,