目的 建立并优化大疱性类天疱疮(BP)抗BP180NC16A IgG抗体亚型的酶联免疫吸附试验(ELISA)检测方法,评估其敏感性和特异性.方法 通过在大肠杆菌中表达并纯化GSTBP180NC16A重组蛋白,建立抗BP180NC16A IgG亚型的ELISA检测方法,检测2009至2012年北京协和医院136例BP患者血清中抗体水平,以20名健康体检者血清作为对照;阳性界值为健康对照血清测得的均值加3倍标准差,高于该界值的判断为阳性.并利用Western印迹法检测其中4种抗体均阳性的患者血清,和ELISA方法进行比较.结果 ELISA法检测的特异性IgG1、IgG2、IgG3和IgG4的阳性界值分别为0.113、0.196、0.154和0.120,20名健康对照4种IgG亚型检测值均低于阳性界值水平,使本检测方法特异性较好.136例患者抗BP180NC16A IgG1、IgG2、IgG3及IgG4抗体亚型阳性率分别为67.6％ (92/136)、45.6％ (62/136)、50.7％(69/136)和54.4％(74/136);其中4种IgG亚型均阳性者29例,占21.3％;至少一种IgG亚型为阳性者112例,占82.4％,即4种亚型综合敏感度为82.4％.而Western印迹检测20例经ELISA证实4种IgG亚型抗体均阳性的患者血清显示IgG1和Igc4阳性人数分别为15、14例.结论 本研究建立的ELISA方法的特异性较好,敏感性尚需进一步提高.
作者：周细平；左亚刚；刘冰；何春霞；刘跃华
来源：中华医学杂志 2013 年 93卷 32期
