目的:探讨人多发性骨髓瘤(MM)肝癌缺失基因1(DLC-1)启动子区CpG岛甲基化情况,以及三氧化二砷( As2 O3)诱导DLC-1基因的去甲基化作用。方法采用甲基特异性PCR 法( MSP)定性检测2008至2012年来自福建医科大学附属协和医院血液内科的52例MM患者DIC基因甲基化状态,反转录( RT)-PCR检测MM患者和人骨髓瘤U266细胞系DLC-1基因的表达情况;采用重亚硫酸盐测序PCR( BSP)法定量检测As2 O3作用前、后人骨髓瘤细胞株U266其DLC-1基因的甲基化状态;荧光定量 PCR 检测U266细胞用药前、后DLC-1基因、DNA甲基转移酶基因( DNMT1、DNMT3a、DNMT3b) mRNA 的表达变化。结果 MM 患者 DLC-1基因的甲基化比例为71.15%(37/52)。 U266细胞DLC-1基因呈甲基化,DLC-1基因不表达;经0.5、1.0、2.0μmol/L As2 O3作用后72 h U266细胞DLC-1基因甲基化率由95.38%下降至63.07%、30.00%及7.69%;荧光定量PCR检测经0.5、1.0、2.0μmol/L As2 O3作用后72 h U266细胞DLC-1基因mRNA表达与未加药组相比分别为其(1.60±0.09)、(3.66±0.17)、(5.29±0.15)倍,而DNMT1、DNMT3a、DNMT3b基因mRNA表达下调(均P<0.05)。结论 DLC-1基因甲基化在MM患者中较为常见,这可能为MM的诊断和治疗提供借鉴;As2 O3可诱导DLC-1
作者:付海英;沈建箴;吴淡森
来源:中华医学杂志 2014 年 36期