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目的 探讨热休克蛋白70 (HSP70)在气道黏液高分泌中的作用及机制.方法 用8%香烟提取物(CSE)处理人气道A549细胞后,分别给予HSP70抗体阻断剂、c-Jun氨基末端激酶(JNK)特异性抑制剂SP600125进行干预.实验共分4组:空白对照组(无血清培养基培养)、CSE刺激组(加入8% CSE培养24 h)、HSP70抗体组(HSP70单抗预处理30 min,再给予8% CSE继续培养24h)、SP600125组(加入JNK特异性抑制剂SP600125 30 μmol/L预处理30 min,再给予8% CSE继续培养24 h).酶联免疫吸附(ELISA)法检测各组中MUC5AC蛋白的相对表达量,逆转录-PCR检测MUC5AC mRNA的相对表达量,Western印迹法检测HSP70水平,Western印迹法检测JNK及激活蛋白-1(主要为c-Jun)磷酸化水平.结果 CSE刺激组细胞MUC5AC蛋白、MUC5AC mRNA、p-JNK、c-Jun、p-c-Jun相对表达量(0.52±0.07、0.64±0.11、0.73±0.06、0.67±0.10、0.67±0.09)均显著高于空白对照组(0.26±0.10、0.28±0.06、0.30±0.05、0.30±0.08、0.36±0.08)、HSP70抗体组(0.30±0.12、0.29±0.09、0.34±0.06、0.47±0.19、0.39±0.13)和SP600125组(0.38±0.06、0.31±0.14、0.39±0.04、0.44±0.12、0.48±0.11),HSP70 (0.75±0.09)也显著高于空白对照组(0.29±0.03)、HSP70抗体组(0.40±0.11)(均P<0.

作者:周治宇;张婷;周向东;李琪;刘春漪

来源:中华医学杂志 2015 年 95卷 8期

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作者:
周治宇;张婷;周向东;李琪;刘春漪
来源:
中华医学杂志 2015 年 95卷 8期
标签:
HSP70热休克蛋白质类 黏蛋白类 香烟提取物 激活蛋白 HSP70 heat-shock proteins Mucins Cigarette smoke extract Activated protein
目的 探讨热休克蛋白70 (HSP70)在气道黏液高分泌中的作用及机制.方法 用8%香烟提取物(CSE)处理人气道A549细胞后,分别给予HSP70抗体阻断剂、c-Jun氨基末端激酶(JNK)特异性抑制剂SP600125进行干预.实验共分4组:空白对照组(无血清培养基培养)、CSE刺激组(加入8% CSE培养24 h)、HSP70抗体组(HSP70单抗预处理30 min,再给予8% CSE继续培养24h)、SP600125组(加入JNK特异性抑制剂SP600125 30 μmol/L预处理30 min,再给予8% CSE继续培养24 h).酶联免疫吸附(ELISA)法检测各组中MUC5AC蛋白的相对表达量,逆转录-PCR检测MUC5AC mRNA的相对表达量,Western印迹法检测HSP70水平,Western印迹法检测JNK及激活蛋白-1(主要为c-Jun)磷酸化水平.结果 CSE刺激组细胞MUC5AC蛋白、MUC5AC mRNA、p-JNK、c-Jun、p-c-Jun相对表达量(0.52±0.07、0.64±0.11、0.73±0.06、0.67±0.10、0.67±0.09)均显著高于空白对照组(0.26±0.10、0.28±0.06、0.30±0.05、0.30±0.08、0.36±0.08)、HSP70抗体组(0.30±0.12、0.29±0.09、0.34±0.06、0.47±0.19、0.39±0.13)和SP600125组(0.38±0.06、0.31±0.14、0.39±0.04、0.44±0.12、0.48±0.11),HSP70 (0.75±0.09)也显著高于空白对照组(0.29±0.03)、HSP70抗体组(0.40±0.11)(均P<0.