目的:探讨锌指Krüppel样转录因子2( KLF2)对慢性阻塞性肺疾病(简称慢阻肺)支气管上皮细胞中γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS )的调控作用。方法(1)临床试验:收集湖南省肿瘤医院胸外科2008年12月—2009年12月肺癌伴或不伴慢阻肺肺叶切除患者临床肺组织标本,分为慢阻肺组和对照组,应用原位杂交及免疫组化检测两组患者肺组织中KLF2、γ-GCS mRNA及蛋白的表达情况;并对KLF2 mRNA及蛋白与γ-GCS mRNA及蛋白, KLF2及γ-GCS 蛋白与吸烟指数、第1秒用力呼气容积( FEV1)占预计值百分比( FEV1%)、FEV1与用力肺活量( FVC)的比值( FEV1/FVC)进行相关分析。(2)动物实验:提取大鼠原代支气管上皮细胞,加入10%烟草烟雾提取物(TSE)培养6 h后,用酶联免疫吸附(ELISA)法检测细胞谷胱甘肽(GSH)含量;将KLF2的特异性抑制剂用脂质体转染至细胞中抑制KLF2蛋白表达;再分为KB组(不予任何处理的空白对照组)、KB+TSE组(加入TSE处理)、NC组(转染miRNA的对照组)、NC+TSE组(miRNA转染和TSE处理)、92a组(转染KLF2抑制剂)、92a+TSE组(KLF2抑制剂转染和TSE处理),用逆转录-PCR、Western印迹法观察各组细胞中KLF2、γ-GCS的mRNA及蛋白质表达变化。结果(1)临床试验:慢阻肺组肺组织中
作者:李洁;戴爱国;黄畅宇;胡瑞成
来源:中华医学杂志 2017 年 97卷 2期