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目的 探讨沉默脂肪酸结合蛋白3(FABP3)基因对脂多糖(LPS)诱导的肺泡上皮细胞A549凋亡和内质网应激的影响.方法 根据处理方法,将A549细胞分为对照组(A549细胞正常培养24 h)、LPS组(10 mg/L的LPS处理A549细胞24 h)、LPS+乱序无意义阴性序列(si-con)组(LPS+si-con组,10 mg/L的LPS处理转染si-con的A549细胞24 h)和LPS+FABP3的小干扰RNA(si-FABP3)组(LPS+si-FABP3组,LPS作用转染si-FABP3的A549细胞24 h),实时荧光定量PCR检测FABP3 mRNA的相对表达量,四甲基噻唑蓝染色法(MTT)检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,Western印迹法检测FABP3、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、活化的caspase-3、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、激活转录因子4(ATF4)和CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)、活化的caspase-12和磷酸化的蛋白激酶激酶B(p-Akt)和PI3K催化亚基p110α(PI3Kp110α)蛋白的相对表达量,酶联免疫吸附法检测白细胞介素(IL)-6、IL-8、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平.结果 LPS组FABP3蛋白和mRNA相对表达量、细胞凋亡率和IL-6、IL-8、TNF-α水平以及活化的caspase-3、GRP78、ATF4、CHOP、活化的caspase-12、p-Akt和PI3Kp110α蛋白相对表达量均显著高于对照组[(1.00±0.09)比(0.53±0.05)、(2.15±0.22)比(1.00±0.10)、(26.1±2.6

作者:吴星;史长松;刘爽;周长江;苗永红;曹振锋

来源:中华医学杂志 2019 年 99卷 48期

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作者:
吴星;史长松;刘爽;周长江;苗永红;曹振锋
来源:
中华医学杂志 2019 年 99卷 48期
标签:
肺泡 上皮细胞 脂肪酸结合蛋白质类 细胞凋亡 内质网应激 Pulmonary alveolar Epithelial cells Fatty acid-binding proteins Apoptosis Endoplasmic reticulum stress
目的 探讨沉默脂肪酸结合蛋白3(FABP3)基因对脂多糖(LPS)诱导的肺泡上皮细胞A549凋亡和内质网应激的影响.方法 根据处理方法,将A549细胞分为对照组(A549细胞正常培养24 h)、LPS组(10 mg/L的LPS处理A549细胞24 h)、LPS+乱序无意义阴性序列(si-con)组(LPS+si-con组,10 mg/L的LPS处理转染si-con的A549细胞24 h)和LPS+FABP3的小干扰RNA(si-FABP3)组(LPS+si-FABP3组,LPS作用转染si-FABP3的A549细胞24 h),实时荧光定量PCR检测FABP3 mRNA的相对表达量,四甲基噻唑蓝染色法(MTT)检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,Western印迹法检测FABP3、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、活化的caspase-3、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、激活转录因子4(ATF4)和CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)、活化的caspase-12和磷酸化的蛋白激酶激酶B(p-Akt)和PI3K催化亚基p110α(PI3Kp110α)蛋白的相对表达量,酶联免疫吸附法检测白细胞介素(IL)-6、IL-8、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平.结果 LPS组FABP3蛋白和mRNA相对表达量、细胞凋亡率和IL-6、IL-8、TNF-α水平以及活化的caspase-3、GRP78、ATF4、CHOP、活化的caspase-12、p-Akt和PI3Kp110α蛋白相对表达量均显著高于对照组[(1.00±0.09)比(0.53±0.05)、(2.15±0.22)比(1.00±0.10)、(26.1±2.6