目的:利用高分辨熔解曲线技术,建立一种快速分子筛查UGT1A1基因缺陷相关的Gilbert ( GS)和Crigler-Najjar综合征( CNS)的方法。方法方法学建立。临床收集的61例不明原因严重高胆红素血症的新生儿样本以待验证,有明确黄疸原因如ABO溶血,G6PD缺乏,败血症,缺血缺氧性脑病的黄疸儿除外。根据亚洲人群UGT1A1基因常见突变位点-G211A 、C686A、 C1091T、C1352T和T1456G,设计特异性HRM引物,建立和优化HRM反应条件。用优化的HRM方法对临床标本进行UGT1A1基因突变的筛查,所有的样本经测序进一步验证。结果 HRM检测方法能够准确地将有突变的样本与无突变的样本区分开来。经HRM 分子筛查,61例严重黄疸儿中,42例检出携带有UGT1A1突变,共检测出4种UGT1A1突变类型。结论本研究建立的PCR-HRM分型技术可以经济、简便、快速、有效的检测UGT1 A1基因异常,为临床诊断GS及CNS提供可靠的依据,也有利于UGT1A1基因相关疾病的大规模的分子流行病学研究。(中华检验医学杂志,2017,40:101-104)
作者:杨辉;杨立业;郑磊;蔡贞
来源:中华检验医学杂志 2017 年 40卷 2期