目的 建立并优化检测人感染高致病禽流感H5N1亚型的逆转录多重PCR(RT-M PCR)方法 .方法 将提取H5N1型高致病禽流感病毒RNA,逆转录为cDNA,测序后针对H5裂解位点及N1的保守区序列设计特异性引物,应用RT-M PCR对H5N1型基因进行检测,并验证所建立方法 的敏感性,通过检测NDV、IBV和IBDV的RNA病毒验证其特异性.结果测序结果表明该株H5N1型与安徽株同源,经RT-M PCR扩增出302 bp和567 bp的两条片段,实验最低检出限为0.500 Pg的RNA病毒,并且特异性高.结论 该法可用于人感染高致病性禽流感病毒H5N1亚型的检测.
作者:刘丁;王政;张一;李元朝;陈萍;吕凤林
来源:中华医院感染学杂志 2009 年 19卷 13期