目的 建立核黄素光化学法灭活血小板病毒的试验方法,探讨PCR用于评价病毒灭活效果的可行性,观察PCR和细胞感染实验在评价核黄素光化学法对血小板病毒灭活效果的一致性.方法 以人巨细胞病毒(HCMV)AD169株作为模型病毒,含不同浓度核黄素的血小板病毒悬液分别以不同辐照剂量的紫外线照射,以病毒细胞感染实验评价灭活效果,选择最佳灭活条件;提取最佳灭活条件处理后血小板悬液中的病毒核酸,以此作为PCR扩增的模板,与病毒细胞感染实验相比较.结果 浓度为150μmol/L的核黄素结合辐照剂量为1500mJ/cm2紫外线照射为最佳灭活条件;当核黄素工作浓度为150μmol/L、紫外线辐照剂量<1500 mJ/cm2时,2条不同长度的HCMV核酸片段均能被扩增出来,而平行的细胞感染实验证明,处理后的HCMV仍具有感染性;当核黄素工作浓度为150 μmol/L、紫外线辐照剂量≥1500 mJ/cm2时,547 bp片段在各处理组中扩增仍为阳性,但1505 bp片段扩增为阴性,平行的细胞感染实验证明了所试病毒被完全灭活.结论 影响核黄素光化学法灭活病原体效果的主要因素为核黄素工作浓度及紫外线辐照剂量;PCR和病毒细胞感染试验一样能够反映出某些灭活病毒方法的效果.
作者：许伟；卫玉芝；李燕萍；钟涛；张循善
来源：中华医院感染学杂志 2010 年 20卷 19期
