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目的 研究HIV-1 Tat对细胞周期蛋白(cyclinB1)的影响.方法 利用人横纹肌肉瘤细胞(TE671)及已转染tat基因的TE671细胞(TT2)细胞系;通过Western印迹检测辐射前后CyclinBl表达变化;使用Northern-Blot及半定量RT-PCR,分析cyclinBl在mRNA水平表达;放线菌酮阻断蛋白合成实验及免疫共沉淀实验检测cyclinB1的稳定性.结果 细胞在接受电离辐射和未接受照射情况下,cyclin B1的表达在转染tat基因细胞中明显增强,Tat蛋白不影响cyclinBl在mRNA水平的表达;放线菌酮阻断蛋白合成实验及Tat蛋白诱导细胞电离辐射后泛素化实验均表明,cyclinB1表达水平的增强主要发生在蛋白质合成后的修饰.结论 HIV-1 Tat蛋白能提高Cyclin Bl的稳定性,降低CyclinB1泛素化水平;该项研究也许有助于利用分子生物学手段,干预Tat蛋白的表达以调控CyclinB1及相关蛋白的表达,进而改变肿瘤细胞周期的进程,影响临床的疗效.

作者:孙薏;匡红;张聪;呼永河;陈健;冯怀志;李硕;黄越承;周平坤

来源:中华医院感染学杂志 2011 年 21卷 10期

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作者:
孙薏;匡红;张聪;呼永河;陈健;冯怀志;李硕;黄越承;周平坤
来源:
中华医院感染学杂志 2011 年 21卷 10期
标签:
HIV-1 Tat 细胞周期蛋白 放线菌酮阻断实验 免疫共沉淀实验 蛋白稳定性
目的 研究HIV-1 Tat对细胞周期蛋白(cyclinB1)的影响.方法 利用人横纹肌肉瘤细胞(TE671)及已转染tat基因的TE671细胞(TT2)细胞系;通过Western印迹检测辐射前后CyclinBl表达变化;使用Northern-Blot及半定量RT-PCR,分析cyclinBl在mRNA水平表达;放线菌酮阻断蛋白合成实验及免疫共沉淀实验检测cyclinB1的稳定性.结果 细胞在接受电离辐射和未接受照射情况下,cyclin B1的表达在转染tat基因细胞中明显增强,Tat蛋白不影响cyclinBl在mRNA水平的表达;放线菌酮阻断蛋白合成实验及Tat蛋白诱导细胞电离辐射后泛素化实验均表明,cyclinB1表达水平的增强主要发生在蛋白质合成后的修饰.结论 HIV-1 Tat蛋白能提高Cyclin Bl的稳定性,降低CyclinB1泛素化水平;该项研究也许有助于利用分子生物学手段,干预Tat蛋白的表达以调控CyclinB1及相关蛋白的表达,进而改变肿瘤细胞周期的进程,影响临床的疗效.